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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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glilyq

银虫 (正式写手)

[交流] 我的测序无信号是什么问题??

我用TA克隆得到了一个样,PCR鉴定正确,然后将菌液拿去测序,片段大约1500BP左右,用通用引物测序。一侧引物成功的测了出来,大约1000BP,另一侧引物没有信号,因此,我怀疑是质粒不纯,又纯化了一次,也是用PCR鉴定,结果与母的条带同,且带单一,当时就拿PCR产物和自己的引物去测序了,没有送质粒。结果还是没有信号!
不知道是什么原因??望求高手解答!
注:我做的事3' RACE ,这个成功测序结果包括了我的EST,测序不成功的就是3‘ploA尾巴那一段!!为什么同样一个质粒就不能测成功呐??
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让梦想不断向前!
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chysx6

铁杆木虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
很可能是3‘ploA尾巴在测序反应时出现了问题
那样的话,再测还是可能不出,因为没有解决实质问题
由于已测出1000bp
建议在900-1000间重新合成一段引物,使用它进行测序(如果确实想序列的话)
2楼2008-08-19 22:40:32
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glilyq

银虫 (正式写手)

多谢指点。我怎么就没有想起来设计新引物测呐。再次感谢!!
让梦想不断向前!
3楼2008-08-19 23:18:24
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chysx6

铁杆木虫 (小有名气)

呵呵
肯花钱就行
对你有帮助很高兴
4楼2008-08-19 23:20:50
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