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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 质谱分析 » HPLC 反向C18柱，倒过来洗，柱压不降反升高了很多，什么情况？
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黑色的字

铁虫 (著名写手)

[求助] HPLC 反向C18柱，倒过来洗，柱压不降反升高了很多，什么情况？ 已有14人参与

最近在用HPLC 反向C18柱分离一些芳香类化合物，柱子是完全新的，用了两天，柱压从87升到了121， 并且柱效也很差了（不论注射进去什么，总是在高极性60%-80%乙腈时才出来），我想是因为我的化合物跟柱子有很强的作用。于是，我决定把柱子倒过来洗，先用的50%乙腈-50%水，又用了100%甲醇，但两次洗完柱压不降反升高了很多。我都是返回到99%水-1%乙腈来测具体的柱压，然后作比较的。这种情况已经发生了好几次了。前边已经搞坏两根柱子了。不知道有没有人遇到过相同情况，也还请高手能够指点一二。真的，这是个新柱子，老板估计杀我的心都有了。
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加油
1楼 2015-08-17 03:22:40
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seannoy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以试试比较亲水的色谱柱，现在也有能走100%水相的色谱柱，还有确认样液可以很好的溶解在流动相中，并控制进样体积，还有极性强的物质在非极性柱上的保留较差，有可能和溶剂峰重叠了，切记只有正着实在不能用了再反冲，反冲过的柱子也不能在正着用了！柱压和梯度流动相有关，在一定范围内的升高是可以接受的！
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欢迎多多批评指正
25楼2015-08-18 14:03:28
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TrickyVick

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
archbishop: 金币+1 2015-08-17 13:38:02
黑色的字: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-08-17 15:37:11
芳香类的甲醇里不溶吧？析出了？

换极性更小的冲，比如tetrahydrofuran一类的，前提是LC能用

你跑gradient也要考虑溶解性啊，你化合物整个gradient都不溶根本不能跑啊。我跑这些都要加5%的THF的。。。
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2楼2015-08-17 04:02:33
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TrickyVick

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
黑色的字: 金币+10, ★★★很有帮助, 恩，谢谢 2015-08-17 15:36:42
另外，都成这样了柱子多多少少都有点损伤了，不过应该不大

你以后跑新东西先用老柱子试
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3楼2015-08-17 04:05:36
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longyi706565

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
黑色的字: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-08-17 15:40:15
你那什么柱子啊，居然用1%的乙腈，一般的柱子根本受不了这么高的水相，柱子不坏才怪
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5楼2015-08-17 10:27:02
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