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求PixFRET插件及使用方法 顺便求助下confocal做FRET的技巧
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求PixFRET的插件,可以应用于Image J上。顺便求个使用攻略,第一次做,不太会用这个软件及插件。 PS:1、最近用confocal作FRET样品,用Leica TCS SP5,用的是LAS AF,非序列扫描,只是设置了多个PMT通道,总是有串色。比如某个样品设置没有第三通道的荧光,但是在扫描时依然有荧光出现。求问是否一定要用LAS FRET SE这个方式不用LAS AF这个方式做样品,还是说用LAS AF,但是用序列扫描来避免串色? 2、此外是否一定要像文献中说的先做单donor,再做单acceptor荧光,然后调节acceptor荧光最低(不太懂这一步,求指教),然后做FRET信号? 3、做FRET时不同通道 PMT检测范围是否应该更窄些?还是说选择软件已有的荧光基团就好? 不知有没有人懂这方面,非常急,在线等! |
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chun.shui
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