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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于斜面不长的问题
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

[求助] 关于斜面不长的问题 已有5人参与

前提：同样的斜面培养基
将在4度冰箱保藏的斜面和-20度保藏的甘油管拿出来传斜面，保藏时间7个月左右，可就为啥长不出来，就算有长出来的也就那么一点点，外观跟之前的一点也不一样。到底是为啥呢？斜面长不好保谈转化率，不知道该怎么办了？跪求解答。
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希望大家多多交流。
1楼 2015-08-14 14:29:31
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shanliwademen

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
张香玲1017: 金币+8, ★★★★★最佳答案, 谢谢！ 2015-08-17 11:09:03
4度的斜面保藏两个月可以，过了两个月就不行了，正常 甘油管不该长不出来，基于楼主描述，现有如下建议：1,保藏的斜面不要再接斜面，加5毫升液体培养基摇床培养，然后转固体平板，2，甘油管转接平板不能一代定论，只要长了菌就没问题，一般都要活化3到5代，一是让菌恢复正常生长特性二是确保菌质稳定未变。如果以上建议不够请用我的黑科学，就是先将甘油管55度水浴6分钟，然后将超净台处理好确保无菌，并将甘油管中的菌接于盛有液体培养基的敞口培养皿中，一级无菌风吹30分钟。活化效果杠杠的。要是以上办法还不能满足你，就用以下两个备用处理办法，1，请专家来活化，2，直接扔垃圾桶里。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2015-08-14 15:00:59
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guozicong

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
张香玲1017: 金币+1, ★★★很有帮助 2015-08-17 11:09:16
斜面保藏时间太长了，像楼上所说的，超过两个月一般都不好再用了。另外就是-20度保藏的甘油管菌种最好是先接到固体平板上活化，长好了再转接到斜面。
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笑看风云淡，坐对云起时。
3楼2015-08-14 22:54:23
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一个不小心就

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼上的黑科学真是厉害，哈哈。我想起以前冬天取土样筛菌，第一步将装土样的瓶子放沸水浴一分钟，老师说这样养能把菌激活一下。我也不多具体原理，你可以试试哦
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4楼2015-08-15 00:11:39
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doukezhiwu

木虫 (著名写手)
一要耐心的等待；二冰箱也好、-80度也好，拿出的斜面都要在室温放置一天或半天后在分离，有个适应过程；三传代几次再看看菌落特征也许就会和原先分离的野生菌株类似。四注意培养基pH；五试管斜面不能有冷凝水；六代活化菌株是需氧菌或是厌氧菌，注意试管塞子的透气性。祝你好运。
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5楼2015-08-16 17:38:00
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谁家的丫头1

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
张香玲1017: 金币+1, ★有帮助 2015-08-17 11:09:50
先用液体的摇一下试试，确定可以长出来了再斜面
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6楼2015-08-16 19:11:15
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X小天T

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
张香玲1017: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-08-17 11:10:03
保存的甘油菌一般是先涂平板，然后挑但菌落到液体培养基，然后继续做其他的实验；4度保存的斜面如一楼所说，时间长了确实不能再用。
不过，一楼回答太赞了！哈哈。请专家，扔垃圾桶
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7楼2015-08-16 20:31:17
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨
引用回帖:
5楼: Originally posted by doukezhiwu at 2015-08-16 17:38:00
一要耐心的等待；二冰箱也好、-80度也好，拿出的斜面都要在室温放置一天或半天后在分离，有个适应过程；三传代几次再看看菌落特征也许就会和原先分离的野生菌株类似。四注意培养基pH；五试管斜面不能有冷凝水；六代 ...

谢谢！
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希望大家多多交流。
8楼2015-08-17 11:09:41
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨
引用回帖:
2楼: Originally posted by shanliwademen at 2015-08-14 15:00:59
4度的斜面保藏两个月可以，过了两个月就不行了，正常 甘油管不该长不出来，基于楼主描述，现有如下建议：1,保藏的斜面不要再接斜面，加5毫升液体培养基摇床培养，然后转固体平板，2，甘油管转接平板不能一代定论，只 ...

向你再请教一问题，转接固体平板，平板培养基是用选择性培养基还是斜面培养基？涂平板时是用划线法还是其它方法？
谢谢指教。
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希望大家多多交流。
9楼2015-08-18 11:36:51
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨
引用回帖:
5楼: Originally posted by doukezhiwu at 2015-08-16 17:38:00
一要耐心的等待；二冰箱也好、-80度也好，拿出的斜面都要在室温放置一天或半天后在分离，有个适应过程；三传代几次再看看菌落特征也许就会和原先分离的野生菌株类似。四注意培养基pH；五试管斜面不能有冷凝水；六代 ...

转接固体平板，平板培养基是用选择性培养基还是斜面培养基？涂平板时是用划线法还是其它方法？
谢谢！
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希望大家多多交流。
10楼2015-08-18 11:49:43
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