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jinshengfang

木虫 (正式写手)

[求助] 求实验室环境中噬菌体鉴定方法 已有2人参与

实验室BL21(DE3)染噬菌体,后来实验室经过甲醛熏蒸,求甲醛熏蒸效果及实验室环境中噬菌体鉴定方法
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生物催化
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caoqingqing

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by csyhaoge at 2015-08-27 01:29:07
你好!因为前一段时间一直在忙着写文章,就没有及时的回复你,不好意思哈~
敏感菌,特别是针对噬菌体的敏感菌,通俗的说,就是能被某一种或某一类噬菌体侵染、裂解的菌株,如你们实验室用到的大肠杆菌BL21(DE3) ...

您好!
请问地衣芽孢杆菌未知温和噬菌体(不知道怎么检测),怎么找到敏感菌?谢谢!
6楼2016-03-24 09:12:13
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a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jinshengfang: 金币+5, ★★★很有帮助, 没办法了,公司不可能让我们一段时间不做菌的 2015-08-13 13:16:58
你们这够狠,我们染噬菌体后就没怎么处理,尽量不养菌,过一段时间就好了。。。具体的鉴定方法,期待高人解答
2楼2015-08-13 08:52:24
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csyhaoge

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jinshengfang: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢 2015-08-13 17:07:00
zhang8826857: 金币+5, MicEPI+1, 鼓励应助,回答的很详细 2015-08-13 20:42:15
一般情况下,空气中噬菌体的含量还是很少,一般不足以造成染噬菌体情况的发生。但实验室若长期做某一种菌的实验,或实验室有在做噬菌体相关实验的话,实验室环境中噬菌体含量升高,就会造成噬菌体污染情况的发生。
特别是对于发酵工业生产,噬菌体污染是一个常见且负责的问题,至今还没有完美的解决方法,只能是采取措施来防治。常见的噬菌体污染防治措施有:
1、防止噬菌体的入侵和蔓延
为防止噬菌体的污染,一定要保持实验室环境的清洁,对实验常用到的设备、器皿、材料等进行灭菌处理,对实验菌种进行妥善的保存等。
2、选用抗噬菌体突变株
当然了,这一方法成本较高,一般实验室选用不了。
3、噬菌体爆发后采取措施进行防治
用次氯酸钠将房间整个清洁消毒,所有器具高温灭菌或用次氯酸钠浸泡。
地面用量:有效氯浓度2500ppm,大于30min; 器具:有效氯浓度500ppm,20min。摇床用甲醛加高锰酸钾熏蒸,用前再用紫外照射半小时; 发酵罐高温灭菌。
如果空气中噬菌体浓度也较高的话,可以用甲醛熏蒸,3g/平米;或用紫外照射,但要注意,因为这两种方法都可能对仪器造成腐蚀。
空气中噬菌体的检测:双层平板法,下层是生产菌或敏感菌的培养基,上层是营养肉汤软琼脂,双层琼脂板开盖放30min,30度培养过夜。看有无噬菌斑。
当然了,这一方法适合空气中噬菌体浓度较高的情况。如空气中噬菌体浓度一般,建议可先用空气抽滤器,之后将吸附于膜上的物质用适量的缓冲液洗脱,双层平板法检测洗脱液中噬菌体的量即可。
3楼2015-08-13 13:18:04
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jinshengfang

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by csyhaoge at 2015-08-13 13:18:04
一般情况下,空气中噬菌体的含量还是很少,一般不足以造成染噬菌体情况的发生。但实验室若长期做某一种菌的实验,或实验室有在做噬菌体相关实验的话,实验室环境中噬菌体含量升高,就会造成噬菌体污染情况的发生。
...

看来是高手呀
我还想请教您一下,如果我需要做溶源菌检测试验,因为现在实验室老染噬菌体,都不知道是种子里就带了噬菌体还是环境中的。
我查了一下说溶源菌用平板来做噬菌斑实验,其中需要敏感菌,那这个敏感菌一般是什么菌了。
我们实验室做的重组BL21(DE3)菌
生物催化
4楼2015-08-13 17:10:00
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