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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量PCR
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lj豆豆蛙

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR 已有2人参与

实在没办法了 荧光内参做了很多次 就是不行 用的质粒 溶解曲线还行 但是标曲就是不行  有没有跟我一样的

荧光定量PCR
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荧光定量PCR-1
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实验狗一枚!
1楼 2015-08-12 13:35:39
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程西

木虫 (小有名气)
你好！我刚接触这个，有个样品也想用荧光分析。但是他们给我无标样定量分析，标样定量分析，压片半定量，融片半定量，压片定量和融片定量这几种选择。我不太明白这几种的区别，想请问下你用的哪种方法测的？

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-08-12 13:41:47
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lj豆豆蛙

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 程西 at 2015-08-12 13:41:47
你好！我刚接触这个，有个样品也想用荧光分析。但是他们给我无标样定量分析，标样定量分析，压片半定量，融片半定量，压片定量和融片定量这几种选择。我不太明白这几种的区别，想请问下你用的哪种方法测的？
...

不好意思哦 我也不知道 我做的是相对定量 没听过你那几种
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实验狗一枚!
3楼2015-08-12 13:48:27
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Lei_gwan

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lj豆豆蛙 at 2015-08-12 13:48:27
不好意思哦 我也不知道 我做的是相对定量 没听过你那几种...

相对定量无需做标准曲线吧？
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4楼2015-08-20 11:02:20
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wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-08-20 23:37:03
溶解曲线和峰都没问题，应该有两个问题，1质粒梯度稀释的不够好    一般10倍稀释，稀释10个梯度，原始质粒和前2个梯度就别要了 从第3个梯度开始用     2再一个加样的时候不要太黑的环境中加，根本看不清，而且加的不准确，白天拉窗帘关灯加就可以了，如果我没看错的话  你的每个重复之间偏离的很多
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5楼2015-08-20 16:19:50
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哎呀那个雨

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

LZ请问你做的相对定量为啥要做标准曲线分析，是因为模板是质粒吗
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啊
6楼2015-08-24 15:11:10
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