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lj豆豆蛙

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR 已有2人参与

实在没办法了 荧光内参做了很多次 就是不行 用的质粒 溶解曲线还行 但是标曲就是不行  有没有跟我一样的

荧光定量PCR
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荧光定量PCR-1
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实验狗一枚!
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程西

木虫 (小有名气)

你好!我刚接触这个,有个样品也想用荧光分析。但是他们给我无标样定量分析,标样定量分析,压片半定量,融片半定量,压片定量和融片定量这几种选择。我不太明白这几种的区别,想请问下你用的哪种方法测的?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-08-12 13:41:47
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lj豆豆蛙

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 程西 at 2015-08-12 13:41:47
你好!我刚接触这个,有个样品也想用荧光分析。但是他们给我无标样定量分析,标样定量分析,压片半定量,融片半定量,压片定量和融片定量这几种选择。我不太明白这几种的区别,想请问下你用的哪种方法测的?
...

不好意思哦 我也不知道 我做的是相对定量 没听过你那几种
实验狗一枚!
3楼2015-08-12 13:48:27
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Lei_gwan

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lj豆豆蛙 at 2015-08-12 13:48:27
不好意思哦 我也不知道 我做的是相对定量 没听过你那几种...

相对定量无需做标准曲线吧?
4楼2015-08-20 11:02:20
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wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-08-20 23:37:03
溶解曲线和峰都没问题,应该有两个问题,1质粒梯度稀释的不够好    一般10倍稀释,稀释10个梯度,原始质粒和前2个梯度就别要了 从第3个梯度开始用     2再一个加样的时候不要太黑的环境中加,根本看不清,而且加的不准确,白天拉窗帘关灯加就可以了,如果我没看错的话  你的每个重复之间偏离的很多
5楼2015-08-20 16:19:50
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哎呀那个雨

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

LZ请问你做的相对定量为啥要做标准曲线分析,是因为模板是质粒吗
6楼2015-08-24 15:11:10
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