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dolphin4283

铜虫 (初入文坛)

[求助] 紧急求助,液相色谱C18柱基线不平,出现鬼峰已有10人参与

之前一直用一个方法检测EGCG的含量,出了出峰时间随着测量次数增加逐渐延长以外也没出现别的什么问题;但是自7月入夏后,再用这种方法检测EGCG含量,基线就不再平了,一直出现鬼峰,如下图:
紧急求助,液相色谱C18柱基线不平,出现鬼峰
之前的图谱4月时:
紧急求助,液相色谱C18柱基线不平,出现鬼峰-1
6月时:
紧急求助,液相色谱C18柱基线不平,出现鬼峰-2
我的方法是B相:0.1%甲酸-甲醇,C相:0.1%磷酸-水, 柱温30度;样品槽25度。 梯度洗脱0到2min,18%B、82%C;2到10min,由18%B、82%C变为50%B、50%C;10到11分半,维持50%B、50%C;11分半到13min,由50%B、50%C18变为%B、82%C,维持2min,结束。之后用初始流动相比例跑基线卸柱。

想问下为何7月后会出现鬼峰,最近2天在跑基线,但是怎么也跑不平,波动很大,已经跑了2天了仍旧是这个样子,想问下这究竟是温度的原因,还是柱效已经不行了,或者是柱子太脏,继续冲会好吗?  求大神相教,谢谢各位帮助!
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copeal

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
来个色谱柱再生程序看看。这个可以网上查查或问工程师。建议更改程序,把有机相提高到90%,至少保持5分钟以清洗色谱柱。

[ 发自小木虫客户端 ]
11楼2015-08-12 19:53:19
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