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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 有关分离度问题
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ruier8873

木虫 (小有名气)

大傻

[求助] 有关分离度问题 已有6人参与

我在摸索方法的时候，样品与杂质的分离度可以达到2.0，然后在进行方法学验证的时候，做了几天分离度都能达到要求，但是在做耐用性的时候，做对照样品，也就是正常样品的时候分离度就只有1.7左右，做耐用性条件都不合格。然后冲柱子再做正常条件，分离度就不合格，我想知道这个是方法问题还是柱子的问题？怎么解决？
注：杂质在分不开的情况下，理论塔板数降低了很多。
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菜鸟一枚，大家多多关照。希望自己能活的糊涂一点
1楼 2015-08-11 13:18:49
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supercat0821

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
12楼: Originally posted by ruier8873 at 2015-08-11 15:13:12
用70水：乙腈 按10%的梯度往上加，直到100乙腈，然后用甲醇冲的。

您是建议怎么冲洗呢？请指点一下...

高水相的时候，冲洗的时间长吗？主要是磷酸盐，用高水相把它冲出来。然后乙腈的话，加到95就行了，用95%乙腈冲就不再用甲醇了。100%乙腈容易造成单向阀里面的宝石球吸上去
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17楼2015-08-11 17:21:55
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longyi706565

金虫 (正式写手)
可能是柱子的问题，方便的话，把前后色谱图看看
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2楼2015-08-11 13:46:50
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xiaoguaijing

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
流动相是什么？色谱条件？
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3楼2015-08-11 13:58:56
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supercat0821

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
柱效下降，造成分离度降低，你把柱子好好冲一下，然后再试试看。
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4楼2015-08-11 14:00:24
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