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志存高远888

银虫 (小有名气)

[求助] 关于小鼠动物实验取血的问题 已有2人参与

求助,我做动物实验,用的是小鼠,造模糖尿病模型:
问题1:我最后取血是采取摘眼球取血,取血量还不到1ml,后边要用的挺多的,怎么办?
问题2:取血后就离心了,7000rpm/min,10min,离出来后血清都有些红,是什么原因啊?会影响后期测各种指标吗?
问题3:我测的指标中包括糖化血清蛋白和糖化血红蛋白,糖化血清蛋白是要取血清,而糖化血红蛋白是要取抗凝全血,但是如图所示,不加抗凝剂离心出来的上清是血清,而加了抗凝剂就是血浆了,不加抗凝剂的话离心后沉淀就凝了,我沉淀要用红细胞,不知道怎么办?
求各位了解的前辈给些建议,谢谢啦~

关于小鼠动物实验取血的问题
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Where there is a will,there is a way.
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yuyue7176

木虫 (小有名气)

我帮我师兄做过一段时间小鼠,我是测肝酶的,取血的话,摘眼球要适当的慢,如果太快,血不容易出,用镊子摘的话可以稍微把眼球拉出来点再摘,如果血还是少,可以边取血,边挤压小鼠心脏,这样出血也会多点, 大概1ml-1.2ml左右,实在不行就两只眼都开
至于血清变红,我也遇到过,你可以试着用3000r/min离心,10min,因为我们当时只要血清,而且后面的都是用试剂盒测指标,用量不是很大,所以后面的我也不清楚了
2楼2015-08-10 08:56:05
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志存高远888

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yuyue7176 at 2015-08-10 08:56:05
我帮我师兄做过一段时间小鼠,我是测肝酶的,取血的话,摘眼球要适当的慢,如果太快,血不容易出,用镊子摘的话可以稍微把眼球拉出来点再摘,如果血还是少,可以边取血,边挤压小鼠心脏,这样出血也会多点, 大概1m ...

嗯嗯,谢谢啦,很受用~
Where there is a will,there is a way.
3楼2015-08-10 17:12:50
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失踪的夏天

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、变红可能是眼球取血时,血流出来被小鼠的毛发沾染,比如小鼠的胡须,可以剪掉,不然容易造成溶血。
2、像楼上说的,镊子夹住突出的眼球,往外拉一点,再摘除眼球,这样血比较多,流到1ml多点的时候按摩心脏,血还会再多些的。我以前做的时候,除非是小鼠病态状况,看着很虚弱,一般都能取到1ml多的,1.5ml也经常有。
3、如果不是特别着急的指标检测,可以不离心,直接放在冰箱4度保存过夜,第二天就会看到上层透明的,很干净,移液枪吸出来特别方便。
生活在此处,当下就是今生。
5楼2015-08-11 10:45:26
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普通回帖

N_挠小黑

新虫 (初入文坛)

你这转速太高了吧,有没有查到要测你的东西转速应该是多少
4楼2015-08-10 22:00:03
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zwwsoul

铜虫 (小有名气)

你好 想问您下你使用小鼠复制糖尿病模型时,链脲佐菌素给的剂量时多大啊。成膜率怎么样 我也想复制糖尿病模型,希望你能分享下经验
6楼2015-11-03 11:17:00
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zwwsoul

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yuyue7176 at 2015-08-10 08:56:05
我帮我师兄做过一段时间小鼠,我是测肝酶的,取血的话,摘眼球要适当的慢,如果太快,血不容易出,用镊子摘的话可以稍微把眼球拉出来点再摘,如果血还是少,可以边取血,边挤压小鼠心脏,这样出血也会多点, 大概1m ...

你们造模时,给药剂量时多大啊
7楼2015-11-03 11:17:33
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引用回帖:
5楼: Originally posted by 失踪的夏天 at 2015-08-11 10:45:26
1、变红可能是眼球取血时,血流出来被小鼠的毛发沾染,比如小鼠的胡须,可以剪掉,不然容易造成溶血。
2、像楼上说的,镊子夹住突出的眼球,往外拉一点,再摘除眼球,这样血比较多,流到1ml多点的时候按摩心脏,血 ...

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8楼2016-05-14 17:38:23
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
9楼2016-05-14 18:19:09
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conquest.ajq

至尊木虫 (正式写手)

一只奋斗的虫

【答案】应助回帖

血清的话,要将取完的血室温静置1h以上,3000rpm-3500rpm离心10-15min。
其实测血糖的话建议用尾尖采血,有微量血糖仪,1滴血就够了。
我们实验过程中经验,如果对小鼠刺激较大,会使小鼠血糖应激性升高,1-2h内都不会降下来
会影响实验判断。可以查阅相关文献。如果检测其他生化指标还好,如果想检测血糖
为包准确,还是尾尖血为好。
惰性是前进道路上最大的阻碍
10楼2016-07-25 15:22:44
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