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求助快速内切酶原理!
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最近MBI推出了5分钟快速内切酶,不知道原理是什么? [ Last edited by 350784478 on 2009-7-14 at 10:15 ] |
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6楼2008-08-16 10:09:36
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤(含特殊感受
2楼2008-08-16 00:09:22
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xyklmu(金币+5,VIP+0):感谢答复,积极交流
xyklmu(金币+5,VIP+0):感谢答复,积极交流
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从动力学上分析,限切酶对DNA的切割只是个瞬间的过程 从聚合酶完成复杂的合成过程速度(约1Kb/min)可以想象得出(理论上有限切酶单分子实验为证), 限切酶对DNA的扫描、识别、切割也是很快的,通常只需数秒 当然这是在酶和DNA极纯的条件下获得的数据 而在实验过程中真正影响酶切速率的往往是DNA及酶的纯度和质量 以及体系中是否存在杂质(因为它们往往会抑制酶活) 所以提供高质量的DNA及酶就成了完成快速酶切的重要问题 MBI开发的新产品-FastDigest™ 限制性内切酶可以在5分钟内特异地切割DNA分子,是对自己酶质量的一种担保及承诺 意在说明自己的酶纯度高 而另一方面提供高质量的DNA也是重要一环 仔细查阅MBI,公司自己也承认“高质量DNA是快速酶切DNA的关键因素,推荐与MBI公司的GeneJET™ Plasmid Miniprep Kit(Cat#K0501/2/3)配套使用纯化DNA模板” 所以,只要自已能够制备出高质量的DNA,使用高纯度的酶,就完全可以达到快速酶切的效果 (注:DNA的局部结构折叠、修饰……也会影响酶切速度) |
3楼2008-08-16 02:16:44

4楼2008-08-16 08:24:23














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