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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » α-亚麻酸和γ-亚麻酸苯酰肼同分异构体的色谱分离
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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)

[求助] α-亚麻酸和γ-亚麻酸苯酰肼同分异构体的色谱分离 已有6人参与

我目前使用UPLC分离多种脂肪酸的苯酰肼，用过两根柱子,一个是BEH C18柱，这根柱子中有三个物质不能分离。另一根柱子是BEH  SHIELD    RP18柱，这根柱子中用BEH
C18柱不能分离的三个物质分开了，但是α-亚麻酸和γ-亚麻酸苯酰肼同分异构体分离度达不到1.5，我试过调酸、调碱、加缓冲盐、梯度洗脱分离度均达不到，流动相为乙腈和水，在实验过程中发现柱温会影响分离度，低温有利于分离，但是我们的柱温箱不具备制冷功能。现在想请教能否有其他方法可以改进这两个同分异构体的分离，加离子对试剂是否有改善？？？现在分离特别着急，希望给点意见谢谢。
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1楼 2015-08-08 15:37:30
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
26楼: Originally posted by 被镌刻的时光 at 2015-08-16 23:06:41
恩，我的化合物如果起始已经比例太低，出峰时间会很晚。我这些化合物在HPLC上流动相乙腈和水的比例要达到86:14.我的物质感觉非极性比较强。有的人说我这个化合物因碳链太长所以调酸碱用处不大哦，所以你说的呈强酸 ...

你可以使用非常快的梯度，但起始梯度不要太强。试试30%乙腈左右。流速应该上去。2.1的柱子应该走到0.2-0.3的样子。你可以试试甲醇体系加碳酸铵（5-10mM）的梯度。另外温度因素可以再试一下，比方说加到五六十度是不是有出峰反转。

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27楼2015-08-17 21:25:52
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匿名

用户注销 (知名作家)

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2楼2015-08-16 08:53:58
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

首先我会试试甲醇-水体系，实在不行才考虑离子对试剂。离子对试剂很难完全洗掉，基本上用过以后柱子就只能固定用离子对了。

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-08-16 08:56:30
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

你是h-class么？ftn的控温最低可以到20度。另外，有没有beh的苯基柱，看看分离度有无改善。上离子对意义不大，因为你的样品是分离度不够，而不是没保留

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2015-08-16 08:59:55
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