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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)

[求助] α-亚麻酸和γ-亚麻酸苯酰肼同分异构体的色谱分离 已有6人参与

我目前使用UPLC分离多种脂肪酸的苯酰肼,用过两根柱子,一个是BEH C18柱,这根柱子中有三个物质不能分离。另一根柱子是BEH  SHIELD    RP18柱,这根柱子中用BEH
C18柱不能分离的三个物质分开了,但是α-亚麻酸和γ-亚麻酸苯酰肼同分异构体分离度达不到1.5,我试过调酸、调碱、加缓冲盐、梯度洗脱分离度均达不到,流动相为乙腈和水,在实验过程中发现柱温会影响分离度,低温有利于分离,但是我们的柱温箱不具备制冷功能。现在想请教能否有其他方法可以改进这两个同分异构体的分离,加离子对试剂是否有改善???现在分离特别着急,希望给点意见谢谢。
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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)

引用回帖:
23楼: Originally posted by klicking at 2015-08-17 14:48:02
该物质侧链较长,个人认为调节pH和使用离子对试剂基本上用处不大,这类物质的分离关键还是看色谱柱与物质之间的选择性!T3你也只能试一试了,T3对含有极性官能团的分子保留与选择性比较好。...

恩我也问过一些师兄师姐,也是这样解释的,不过最后实在分离不出来,所以也有尝试,但是没有效果,只是没有尝试三乙胺。可能就是固定相的选择性问题比较大。只是老师希望我搞清楚这个物质的性质,从本质上去考虑,所以想问问我的物质显什么性?文献里说的乙酸苯酰肼高PH下呈离子化状态(我这个化合物在中性是呈淡黄色的,加碱后呈紫色,这根分子存在状态有关吗?),PH=7下分子状态,我就不知道怎么回事了。
25楼2015-08-17 15:03:12
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查看全部 31 个回答

匿名

用户注销 (知名作家)

精修问题可私信


本帖仅楼主可见
2楼2015-08-16 08:53:58
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

首先我会试试甲醇-水体系,实在不行才考虑离子对试剂。离子对试剂很难完全洗掉,基本上用过以后柱子就只能固定用离子对了。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-08-16 08:56:30
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

你是h-class么?ftn的控温最低可以到20度。另外,有没有beh的苯基柱,看看分离度有无改善。上离子对意义不大,因为你的样品是分离度不够,而不是没保留

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2015-08-16 08:59:55
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