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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)

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专业: 色谱分析

[求助] α-亚麻酸和γ-亚麻酸苯酰肼同分异构体的色谱分离已有6人参与

我目前使用UPLC分离多种脂肪酸的苯酰肼，用过两根柱子,一个是BEH C18柱，这根柱子中有三个物质不能分离。另一根柱子是BEH SHIELD RP18柱，这根柱子中用BEH
C18柱不能分离的三个物质分开了，但是α-亚麻酸和γ-亚麻酸苯酰肼同分异构体分离度达不到1.5，我试过调酸、调碱、加缓冲盐、梯度洗脱分离度均达不到，流动相为乙腈和水，在实验过程中发现柱温会影响分离度，低温有利于分离，但是我们的柱温箱不具备制冷功能。现在想请教能否有其他方法可以改进这两个同分异构体的分离，加离子对试剂是否有改善？？？现在分离特别着急，希望给点意见谢谢。

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1楼 2015-08-08 15:37:30

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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)

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引用回帖:

23楼: Originally posted by klicking at 2015-08-17 14:48:02
该物质侧链较长，个人认为调节pH和使用离子对试剂基本上用处不大，这类物质的分离关键还是看色谱柱与物质之间的选择性！T3你也只能试一试了，T3对含有极性官能团的分子保留与选择性比较好。...

恩我也问过一些师兄师姐，也是这样解释的，不过最后实在分离不出来，所以也有尝试，但是没有效果，只是没有尝试三乙胺。可能就是固定相的选择性问题比较大。只是老师希望我搞清楚这个物质的性质，从本质上去考虑，所以想问问我的物质显什么性？文献里说的乙酸苯酰肼高PH下呈离子化状态（我这个化合物在中性是呈淡黄色的，加碱后呈紫色，这根分子存在状态有关吗？），PH=7下分子状态，我就不知道怎么回事了。