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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)

[求助] α-亚麻酸和γ-亚麻酸苯酰肼同分异构体的色谱分离 已有6人参与

我目前使用UPLC分离多种脂肪酸的苯酰肼,用过两根柱子,一个是BEH C18柱,这根柱子中有三个物质不能分离。另一根柱子是BEH  SHIELD    RP18柱,这根柱子中用BEH
C18柱不能分离的三个物质分开了,但是α-亚麻酸和γ-亚麻酸苯酰肼同分异构体分离度达不到1.5,我试过调酸、调碱、加缓冲盐、梯度洗脱分离度均达不到,流动相为乙腈和水,在实验过程中发现柱温会影响分离度,低温有利于分离,但是我们的柱温箱不具备制冷功能。现在想请教能否有其他方法可以改进这两个同分异构体的分离,加离子对试剂是否有改善???现在分离特别着急,希望给点意见谢谢。
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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)

引用回帖:
20楼: Originally posted by superyeast at 2015-08-17 14:27:02
你这个化合物有邻位硝基,酸性蛮强的。试试加TFA或磷酸。...

有邻位硝基,酸性很强?是说是N-H上的氢电离才有强酸性吗?我问过其他人说是接近中性所以我有点混乱了,也试过用磷酸调ph到3和2.5,不调酸直接用水(6.3)氨水调碱到10,都有试过分离度没有大的变化最多从1.39到1.40。你说的用三乙胺这是属于离子对试剂么?为什么文献里提到在ph=7时呈分子状态呢,但高PH下离子化(感觉有点矛盾)
22楼2015-08-17 14:43:34
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查看全部 31 个回答

匿名

用户注销 (知名作家)

精修问题可私信


本帖仅楼主可见
2楼2015-08-16 08:53:58
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

首先我会试试甲醇-水体系,实在不行才考虑离子对试剂。离子对试剂很难完全洗掉,基本上用过以后柱子就只能固定用离子对了。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-08-16 08:56:30
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

你是h-class么?ftn的控温最低可以到20度。另外,有没有beh的苯基柱,看看分离度有无改善。上离子对意义不大,因为你的样品是分离度不够,而不是没保留

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2015-08-16 08:59:55
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