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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)

[求助] α-亚麻酸和γ-亚麻酸苯酰肼同分异构体的色谱分离 已有6人参与

我目前使用UPLC分离多种脂肪酸的苯酰肼,用过两根柱子,一个是BEH C18柱,这根柱子中有三个物质不能分离。另一根柱子是BEH  SHIELD    RP18柱,这根柱子中用BEH
C18柱不能分离的三个物质分开了,但是α-亚麻酸和γ-亚麻酸苯酰肼同分异构体分离度达不到1.5,我试过调酸、调碱、加缓冲盐、梯度洗脱分离度均达不到,流动相为乙腈和水,在实验过程中发现柱温会影响分离度,低温有利于分离,但是我们的柱温箱不具备制冷功能。现在想请教能否有其他方法可以改进这两个同分异构体的分离,加离子对试剂是否有改善???现在分离特别着急,希望给点意见谢谢。
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

UHPLC配用固定相颗粒小于2微米的柱子,它的最佳流速比普通柱要高。你降低流速反而不利于分离。试试用你目前最好的条件,加快流速(50%以上)试试。

[ 发自小木虫客户端 ]
13楼2015-08-17 09:58:24
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匿名

用户注销 (知名作家)

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2楼2015-08-16 08:53:58
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

首先我会试试甲醇-水体系,实在不行才考虑离子对试剂。离子对试剂很难完全洗掉,基本上用过以后柱子就只能固定用离子对了。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-08-16 08:56:30
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

你是h-class么?ftn的控温最低可以到20度。另外,有没有beh的苯基柱,看看分离度有无改善。上离子对意义不大,因为你的样品是分离度不够,而不是没保留

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2015-08-16 08:59:55
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