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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 请问液相分离问题
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yhw19848

铁虫 (初入文坛)

[交流] 请问液相分离问题

液相条件：10ul，1ml/min，A:B=65:35（NaH2PO4:ACN）

请问，怎样改变条件才能让第三个峰和前边的溶剂峰分离呢？

我测得是四环素（用5%高氯酸配制），抗生素的一种。上边的方法是国标的方法。现在存在的问题是，按照国标配的标准曲线浓度，都不出峰，只有提高浓度（国标的10倍以上）才能出峰，这样的话，做就没意义了。因为实际样品中四环素的含量是很低的，难道是柱子的原因还是其他的原因？国标应该是没有问题的，但是我还没有重复出来，请大家帮忙分析一下。

国标的柱子：ODS C18（5um）6.2mm*15cm

我现在使用的柱子：ZORBAX Eclipse XDB-C18 (5um) 4.6mm*15cm，仪器是安捷伦1200液相色谱仪。




谢谢回答。
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1楼 2008-08-15 10:52:55
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chenfengpolang

金虫 (著名写手)
★
wingcat(金币+1,VIP+0):谢谢
药典方法为下述流动相，柱子pH大于8
0.1mol草酸铵溶液-二甲基甲酰胺-0.2mol磷酸二氢铵溶液（68：27：5）用氨调8.3
与你说的差别很大啊!
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乘风破浪，生生不息，衔一枝橄榄，为你带来永远的春天，和你慢慢地变老，幸哉，乐哉！
8楼2008-08-17 12:55:30
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lxgllh

铜虫 (初入文坛)
换根柱子试一下吧，另外你的检测波长没有设参比吧
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2楼2008-08-15 16:13:13
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yhw19848

铁虫 (初入文坛)
设参比是什么意思呢？
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3楼2008-08-15 18:01:08
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tsl

银虫 (小有名气)
我个人觉得还是因为柱型不一样，所以就只能从流动相的组成。比例。缓冲液浓度、PH值考虑优化分离条件。
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4楼2008-08-17 08:46:45
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