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yhw19848

铁虫 (初入文坛)

[交流] 请问液相分离问题

液相条件:10ul,1ml/min,A:B=65:35(NaH2PO4:ACN)

请问,怎样改变条件才能让第三个峰和前边的溶剂峰分离呢?

我测得是四环素(用5%高氯酸配制),抗生素的一种。上边的方法是国标的方法。现在存在的问题是,按照国标配的标准曲线浓度,都不出峰,只有提高浓度(国标的10倍以上)才能出峰,这样的话,做就没意义了。因为实际样品中四环素的含量是很低的,难道是柱子的原因还是其他的原因?国标应该是没有问题的,但是我还没有重复出来,请大家帮忙分析一下。

国标的柱子:ODS C18(5um)6.2mm*15cm

我现在使用的柱子:ZORBAX Eclipse XDB-C18 (5um) 4.6mm*15cm,仪器是安捷伦1200液相色谱仪。




谢谢回答。
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lxgllh

铜虫 (初入文坛)

换根柱子试一下吧,另外你的检测波长没有设参比吧
2楼2008-08-15 16:13:13
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yhw19848

铁虫 (初入文坛)

设参比是什么意思呢?
3楼2008-08-15 18:01:08
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tsl

银虫 (小有名气)

我个人觉得还是因为柱型不一样,所以就只能从流动相的组成。比例。缓冲液浓度、PH值考虑优化分离条件。
4楼2008-08-17 08:46:45
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cm1130

金虫 (正式写手)

觉得可能是你的检测器的问题,换个检测器试试
5楼2008-08-17 09:12:57
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jixf_1114

金虫 (正式写手)

做检测器能量测试
6楼2008-08-17 10:00:42
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chenfengpolang

金虫 (著名写手)

附件上什么都没有?,
乘风破浪,生生不息,衔一枝橄榄,为你带来永远的春天,和你慢慢地变老,幸哉,乐哉!
7楼2008-08-17 12:48:09
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chenfengpolang

金虫 (著名写手)


wingcat(金币+1,VIP+0):谢谢
药典方法为下述流动相,柱子pH大于8
0.1mol草酸铵溶液-二甲基甲酰胺-0.2mol磷酸二氢铵溶液(68:27:5)用氨调8.3
与你说的差别很大啊!
乘风破浪,生生不息,衔一枝橄榄,为你带来永远的春天,和你慢慢地变老,幸哉,乐哉!
8楼2008-08-17 12:55:30
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