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1楼 2015-08-06 09:43:24

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673643401

铁虫 (小有名气)

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我们实验室一直用TBST（吐温20 0.1%），效果还不错

2楼2015-08-06 10:01:52

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re-take

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TBST，第一次做的话可以多设几个梯度比较好

船到桥头自然直

3楼2015-08-06 10:44:12

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lavender_li

银虫 (小有名气)

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一般的抗体用PBS-T，磷酸化蛋白的抗体用TBS-T

4楼2015-08-06 13:22:40

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admission

木虫 (著名写手)

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用pbst或tbst都可以的吧，我们一般用tbst。之前也做过用直接用封闭液稀释，效果还不错

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5楼2015-08-06 13:59:33

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小雨莎莎

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我们之前用过TBST配的5%脱脂奶粉来稀释，不过这样的话保存时间不长，尤其对于一抗来说，就很浪费了。后来我们买了碧云天的一抗稀释液，里面有叠氮化钠的，稀释后的一抗能反复用好多次。至于二抗的话，我还是用TBST配的5%的脱脂奶粉来稀释。这个注意，二抗的HRP活性会受叠氮化钠影响，千万不能用一抗稀释液配，其他其实没什么特别的咯~~

6楼2015-08-09 10:44:54

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橙子哥01

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用TBST稀释的5%的牛奶就行

7楼2015-08-09 21:45:38

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sylar1022

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封闭液就可以了，敷抗体还能减少非特异

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8楼2015-08-09 21:56:58

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凉若馨昔

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mtyx: 金币+1 2015-08-22 20:13:40

第一，封闭液（5%牛奶用TBST稀释）第二，TBST直接洗膜。我们实验室每个人选择的方式不同，洗出来的效果差不多，ＴＢＳＴ可以多洗几次，每次１５～２０分钟，洗个三次差不多ＯＫ～

不做谁的谁，只做你自己~

9楼2015-08-22 14:17:14

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zlhzlh2015

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一抗如果宝贵的话可以购买一抗稀释液，二抗用含5%non-fat milk的TBST即可。