应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 关于全质粒PCR进行定点突变，一测序就不对
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
21/1返回列表
查看: 2831  |  回复: 1
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tea11111

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于全质粒PCR进行定点突变，一测序就不对 已有1人参与

我用全质粒PCR定点突变的方法，质粒大小7.7Kb，能够扩增出条带，转化后，菌落PCR验证也对，提质粒双酶切验证也对，可是一测序，就错，有额外突变，做了几次都突变。这是怎么回事呢？因为扩增片段太大，酶的能力不行吗，我用的PFU？可是我看网上好多人也这么做，怎么就不突变呢，都说挺简单就做出来
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-08-05 09:28:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

情毒之殇

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
会不会是突变的地方跟基因其他地方有相同片段，这样设计的引物或许在这几个地方都会结合上去
赞一下 回复此楼
我们的心是荒野还是沃土？！
2楼2015-08-05 10:59:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tea11111 的主题更新
21/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 307求调剂 +8 超级伊昂大王 2026-03-24 8/400 2026-03-27 11:23 by leaiy
[考研] 299求调剂 +3 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:22 by laoshidan
[考研] 化学308分求调剂 +7 你好明天你好 2026-03-23 7/350 2026-03-27 11:16 by 不吃魚的貓
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +3 路痴小琪 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:15 by W温文尔雅
[考研] 调剂推荐 +5 清酒714 2026-03-26 6/300 2026-03-27 11:12 by 不吃魚的貓
[考研] 材料学硕333求调剂 +8 北道巷 2026-03-24 8/400 2026-03-27 10:18 by 我是小康
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +9 NIFFFfff 2026-03-20 9/450 2026-03-27 10:13 by dick_runner
[考研] 085600材料与化工306 +9 z1z2z3879 2026-03-21 10/500 2026-03-27 08:44 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分，求调剂 +3 0857求调剂. 2026-03-24 3/150 2026-03-27 01:18 by 求知若渴lz
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 305求调剂 +4 哇卢卡库 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:58 by sanrepian
[考研] 086000生物与医药292求调剂 +6 小小陈小小 2026-03-22 9/450 2026-03-26 15:58 by dick_runner
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +5 曼111 2026-03-24 6/300 2026-03-26 13:04 by 13756423260
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[考研] 26考研-291分-厦门大学（085601）-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap－ 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 300分，材料，求调剂，英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 300求调剂，材料科学英一数二 +5 leaflight 2026-03-24 5/250 2026-03-24 16:25 by laoshidan
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭