应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒提取率低
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
61/1返回列表
查看: 1452  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

christine546

铜虫 (初入文坛)

[求助] 质粒提取率低 已有1人参与

质粒小剂量提取过程中，由于操作上的失误，将离心后的上清移到制备管后进行空柱离心，后续仍按protol进行操作，结果浓度为平常浓度的1/4左右。指教仅多出的这一步空柱离心如何影响实验结果？
回复此楼

» 猜你喜欢
苦谁没有呢?
1楼 2015-08-04 23:33:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
christine546: 金币+5, ★有帮助 2015-08-05 23:15:22
请具体说明你的操作步骤，这样不知道你说的是哪步。
赞一下 回复此楼
2楼2015-08-05 08:52:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

christine546

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 673643401 at 2015-08-05 08:52:59
请具体说明你的操作步骤，这样不知道你说的是哪步。

Axygen AP-MN-P-50 质粒小量提取试剂盒
加S1,S2,S3后离心，吸取上清时从移液枪头看到类似糖浆的物质（感觉浓度挺高的）；然后，转移到膜上后，空柱离心，再W1,W2洗两回，空柱离心，最后洗脱。
赞一下 回复此楼
苦谁没有呢?
3楼2015-08-05 23:13:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

“吸取上清时从移液枪头看到类似糖浆的物质（感觉浓度挺高的）”这种现象是不正常的，说明你前面的操作有问题。
1.你的菌是新鲜的吗？如果是放在4度冰箱几天后再提质粒，那效率一定低
2.看说明书，你的柱子是否需要平衡
3.加S1后，要彻底悬浮细菌沉淀（如果有未彻底混匀的菌块，会影响裂解，导致提取量和纯度偏低）
4.加S2后，轻轻混匀，此时军爷应变得清凉粘稠
5.加S3后，上下翻转6-8次，出现白色絮状沉淀，之后离心得到很 清澈的上清，如果不是这样，说明你前面的操作有问题或试剂盒有问题
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2015-08-06 08:41:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

christine546

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 673643401 at 2015-08-06 08:41:32
“吸取上清时从移液枪头看到类似糖浆的物质（感觉浓度挺高的）”这种现象是不正常的，说明你前面的操作有问题。
1.你的菌是新鲜的吗？如果是放在4度冰箱几天后再提质粒，那效率一定低
2.看说明书，你的柱子是否需 ...

重新做了一遍，浓度还是80多ug/ul，说明不是个人操作问题。忘了提及摇菌前的菌体是经过保菌处理的。挑菌重新摇上后提取质粒浓度为290ug/ul，基本正常了。
赞一下 回复此楼
苦谁没有呢?
5楼2015-08-09 22:06:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by christine546 at 2015-08-09 22:06:51
重新做了一遍，浓度还是80多ug/ul，说明不是个人操作问题。忘了提及摇菌前的菌体是经过保菌处理的。挑菌重新摇上后提取质粒浓度为290ug/ul，基本正常了。...

正常就好了，可以继续进行实验了。
赞一下 回复此楼
6楼2015-08-10 08:22:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 christine546 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工301分求调剂院校 +18 刺痛jk 2026-04-06 19/950 2026-04-07 00:02 by longlong0822
[考研] 277求调剂 +3 倪建设 2026-04-06 3/150 2026-04-06 22:39 by qlm5820
[考研] 328求调剂 +3 ghhh88888 2026-04-06 3/150 2026-04-06 21:35 by 啵啵啵0119
[考研] 349求调剂 +11 zwjjjjjj 2026-03-31 12/600 2026-04-06 21:27 by zwjjjjjj
[考研] 0703调剂，一志愿天津大学319分 +16 haaaabcd 2026-04-05 17/850 2026-04-06 19:25 by 尚水阁主
[考研] 机械专硕274求调剂，不挑专业学校 +6 泛泛2333 2026-04-05 8/400 2026-04-06 18:06 by 泛泛2333
[考研] 281求调剂 +8 椰子蘑菇 2026-04-06 8/400 2026-04-06 10:38 by 蓝云思雨
[考研] 296求调剂 +3 汪！？！ 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:13 by 啵啵啵0119
[考研] 282求调剂 +7 aaa车辆 2026-04-02 11/550 2026-04-05 17:24 by yulian1987
[考研] 311分 22408 求调剂 +3 bing_bot 2026-04-03 3/150 2026-04-05 00:43 by chongya
[考研] 材料调剂 +18 一样YWY 2026-04-02 19/950 2026-04-04 22:14 by hemengdong
[考研] 材料调剂 +10 懒羊羊轻置玉臀 2026-04-02 11/550 2026-04-04 21:56 by laoshidan
[考研] 一志愿武理材料工程302调剂环化或化工 +19 Doleres 2026-03-31 20/1000 2026-04-04 16:44 by 啊俊！
[考研] 0710生物学336分求调剂 +6 kiyy 2026-04-01 8/400 2026-04-04 10:10 by kiyy
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:06 by arrow8852
[考研] 085600专硕材料与化工348分求调剂 +10 上学啦！ 2026-04-01 11/550 2026-04-03 14:13 by 百灵童888
[考研] 283求调剂 +3 jiouuu 2026-04-03 4/200 2026-04-03 13:28 by jiouuu
[考研] 重庆大学材料与化工085600，初试370+，求求调剂建议 +8 shzhou_ 2026-04-01 9/450 2026-04-03 09:31 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿复旦材料，英一专硕，总分357调剂 +4 1050389037 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:40 by dongzh2009
[考研] 285求调剂 +14 AZMK 2026-04-02 14/700 2026-04-02 15:54 by 上九天揽月（好�
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭