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江小萍

银虫 (正式写手)

[求助] 多酚氧化酶催化速率与底物浓度成反比 已有1人参与

利用多酚氧化酶与底物邻苯二酚反应,测吸光度420nm,用不同的底物浓度相同酶浓度时发现,底物浓度越低测出来的od值反而越大?这是什么原因,已经重复了好几次了。结果都是一样的。。本来想做双倒数作图的。这样根本做不出来~怎么办呀?
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答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

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你的问题的关键就是酶和底物的浓度比,如果酶的量加少了,也会出现这种情况,你把数据截图给我看一下,双倒数曲线的那个数据,每个反应条件下的速率也发过来,我看看,包括你测得一些OD420曲线
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9楼2015-08-05 09:50:13
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普通回帖

答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与,应助指数 +1
江小萍: 金币+50, ★★★很有帮助 2015-08-05 09:14:38
江小萍: 金币+50 2015-08-05 18:23:06
你看一下是不是底物的浓度范围不对,你自己调高或者降低一下底物的浓度范围
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2楼2015-08-04 18:26:49
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江小萍

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 答非所问 at 2015-08-04 18:26:49
你看一下是不是底物的浓度范围不对,你自己调高或者降低一下底物的浓度范围

浓度从0.5Ml调到50mM,结果都是一样的~
3楼2015-08-04 18:39:41
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答非所问

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ET.....

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 江小萍 at 2015-08-04 18:39:41
浓度从0.5Ml调到50mM,结果都是一样的~...

50mM以下试试看,前面这么多浓度你选了那几个浓度?
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4楼2015-08-04 19:07:47
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江小萍

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 答非所问 at 2015-08-04 19:07:47
50mM以下试试看,前面这么多浓度你选了那几个浓度?...

一开始做的是0.5、0.25、0.125、0.1、0.05M这样的,后来一直调,今天做了50、40、30、20、10mM这样的梯度,做出来的结果还是浓度小的吸光度值比较大~
5楼2015-08-04 19:19:57
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dong5391

金虫 (著名写手)

江湖散仙

貌似有金币可以拿

[ 发自小木虫客户端 ]
我思故我在
6楼2015-08-04 20:37:30
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答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

优秀版主

文献报道的浓度貌似50mM左右吧
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7楼2015-08-04 21:20:04
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江小萍

银虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 答非所问 at 2015-08-04 21:20:04
文献报道的浓度貌似50mM左右吧

50、40、30、20、10mM的梯度做出来也是浓度小的速率较快~
8楼2015-08-05 09:15:55
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江小萍

银虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 答非所问 at 2015-08-05 09:50:13
你的问题的关键就是酶和底物的浓度比,如果酶的量加少了,也会出现这种情况,你把数据截图给我看一下,双倒数曲线的那个数据,每个反应条件下的速率也发过来,我看看,包括你测得一些OD420曲线

嗯 对的。我今天加了酶量然后数据正常了~
10楼2015-08-05 18:22:35
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