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ttlemon77

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★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ttlemon77: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢您的回帖,可是我的问题还没有解决,所以不能把金币全给您,还是谢谢了! 2015-08-07 16:57:01
PBS不能当做包被液,包被液:碳酸盐缓冲液,配方:碳酸钠1.59g 碳酸氢钠2.93g,稀释到1L(PH 9.6)
2楼2015-08-05 08:37:18
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ttlemon77

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3楼2015-08-05 08:48:19
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铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ttlemon77 at 2015-08-05 08:48:19
谢谢您的回答,不过我看论坛里也有提到用PBS做包被液的。http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2325433这个里面提到了很多种。
想问一下,包被液使用不当的话是包被的效果会不好,还是会彻底包被不上呢?...

ELISA绝大部分都是用碳酸盐缓冲液包被的(请跟主流走),PBS或许能包被上(我没试过),但你既不用酶标板,用不用主流包被液,包被效果肯定很差,中途还要多次洗涤,所以结果可想而知
4楼2015-08-05 09:16:51
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5楼2015-08-05 09:46:33
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6楼2015-08-07 14:52:52
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【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by ttlemon77 at 2015-08-07 14:52:52
昨天试了一下,用了酶标板,用您推荐的碳酸盐缓冲液,ph9.6,用浓度为20 μg/mL的一抗,4 ℃过夜。之后用30 μg/mL的二抗,37度孵育两个小时,还是没有荧光结果。。。这是不是可以说明是蛋白的种类的问题了呢?...

建议你做阳性对照,如果阳性对照显色了,说明你的elisa没有问题,是你的蛋白原因,如果阳性对照没显色,就有可能是你elisa的原因
7楼2015-08-07 15:43:17
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8楼2015-08-07 16:44:06
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引用回帖:
8楼: Originally posted by ttlemon77 at 2015-08-07 16:44:06
阳性对照是什么意思呢?是说用显色的方法再做一下吗?我这里做的都是阳性的呀,只不过是荧光的。这些荧光在没冲洗之前是可以看到很强的绿光的,但是冲洗之后就没了。。。...

那就不能用elisa方法检测了。实在帮不了你了,问问其他人吧
9楼2015-08-07 16:55:12
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10楼2015-08-07 16:58:50
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