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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 考马斯亮蓝法测蛋白怎么算总体的蛋白质提取率，有公式没，求高人指点
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feiwen_1987

新虫 (初入文坛)

[求助] 考马斯亮蓝法测蛋白怎么算总体的蛋白质提取率，有公式没，求高人指点 已有2人参与

我用考马斯量蓝法测蛋白含量，吸光度测出来后，用制得标准曲线算出来含量，但是怎么算总体的蛋白含量啊，还有怎么算提取率，求高人指点哈
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1楼 2015-08-03 17:55:21
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是水货

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by feiwen_1987 at 2015-08-04 10:32:16
我的样品是用干样，原料为250g红稗粉，经过酶法提取后的沉淀物即含有蛋白质的沉淀物重量为3.69g，然后，我用考马斯亮蓝法测，取0.01g待测样品配制定容到100ml作为待测样液.按照考马斯亮蓝法操作，取出样品待测液0. ...

0.2ml含有蛋白质19.08ug。换算到100ml中含有9.54mg，即0.01g含有这么多蛋白质，则3.69g含蛋白质为3.52026g。提取率为95.4%。
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4楼2015-08-04 20:04:09
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是水货

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
feiwen_1987(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助，希望继续关注楼主回复，谢谢 2015-08-04 09:23:01
feiwen_1987(99503102代发): 金币+4, 谢谢应助，继续加油！ 2016-01-12 19:51:07
吸光值结合标曲得出你移取样品中蛋白质含量。你提取之后剩余溶液的体积与刚得到的数值相乘，是你 得到的总蛋白质。用得到的总蛋白质/提取物，提取率按湿样还是干样来计算，需要注明。
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2楼2015-08-03 20:02:52
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feiwen_1987

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 是水货 at 2015-08-03 20:02:52
吸光值结合标曲得出你移取样品中蛋白质含量。你提取之后剩余溶液的体积与刚得到的数值相乘，是你 得到的总蛋白质。用得到的总蛋白质/提取物，提取率按湿样还是干样来计算，需要注明。

我的样品是用干样，原料为250g红稗粉，经过酶法提取后的沉淀物即含有蛋白质的沉淀物重量为3.69g，然后，我用考马斯亮蓝法测，取0.01g待测样品配制定容到100ml作为待测样液.按照考马斯亮蓝法操作，取出样品待测液0.5ml,补水至1ml，再加5ml考马斯亮蓝溶液，然后取出200ul加在酶标盘上进行测吸光度，用酶标仪测得的吸光度A值为0.071，标准曲线的线性方程为y=0.0037x+0.0004，按照方程查的蛋白浓度为19.08ug,我想请问，我的3.69g里面总共有多少蛋白质，麻烦一下，因为我要算蛋白质的提取率，所以这个问题一直困扰的我，如果你知道怎么算的话，帮我一下，谢谢。
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3楼2015-08-04 10:32:16
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feiwen_1987

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 是水货 at 2015-08-04 20:04:09
0.2ml含有蛋白质19.08ug。换算到100ml中含有9.54mg，即0.01g含有这么多蛋白质，则3.69g含蛋白质为3.52026g。提取率为95.4%。...

恩，你说的有道理，但是我想再问一下，那个从0.5ml里面取出的200ul待测液得到的吸光度0.071，经过线性方程得到的蛋白浓度是19.08ug/ml，不是蛋白含量19.08ug,这个我表达错了，请问19.08ug/ml这个是不是就是200ul里面的蛋白含量。。。还是说19.08ug/ml是0.5ml里面的蛋白浓度。
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5楼2015-08-05 17:58:05
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