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kongximan

新虫 (初入文坛)

[求助] 小妹求助各路大神液相分离条件的问题~~不胜感激~~ 已有9人参与

我是研究群体感应的,然后从样品里提取AHLs,主要是C4-HSL,但它是总是和其它物质分不开,用过甲醇和水做流动相,后来感觉效果不好,又用了乙腈和水(里面都加了0.1%甲酸),分离效果好一点,但还是不是单独的峰,而且走一走基线会向上漂移。
下面是我的液相图,第一张是我的样品图,6号峰是我的样品峰,第二张图是样品和标准品的比对图,条件是乙腈和水梯度走,流速0,25ml/min,走40min。求各位相关专业人士给予建议,不胜感激!

小妹求助各路大神液相分离条件的问题~~不胜感激~~
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小妹求助各路大神液相分离条件的问题~~不胜感激~~-1
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猫猫爱吃小鱼

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一个试着调整流速,看流速的调整对出峰的影响是什么,如果在不调整流动相条件下流速调高出峰的分离度是否有变化,是变大还是变小,然后再试着调一个合适的流速,第二个试着调整梯度的浓度比和梯度时间区间,方法的摸索就是比较和摸索的过程,另外实在不行,也可考虑换个相适应的色谱柱
5楼2015-08-04 15:32:16
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天空下的傻瓜

铁杆木虫 (知名作家)

来自猩猩的我

加甲醇等度走

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
众人皆醉,惟我独醒,就此沉沦,人称睡神。
2楼2015-08-03 19:12:36
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liuhaifen

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用梯度走,基线上飘是很正常的;建议你查查文献或着调节流动相的比例,和你所选用的色谱柱也有一定的关系。
3楼2015-08-03 20:48:57
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txq5346382

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
流速太低了,换甲醇和水梯度试试看
4楼2015-08-03 22:39:00
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