24小时热门版块排行榜    

查看: 2074  |  回复: 13

kongximan

新虫 (初入文坛)

[求助] 小妹求助各路大神液相分离条件的问题~~不胜感激~~已有9人参与

我是研究群体感应的,然后从样品里提取AHLs,主要是C4-HSL,但它是总是和其它物质分不开,用过甲醇和水做流动相,后来感觉效果不好,又用了乙腈和水(里面都加了0.1%甲酸),分离效果好一点,但还是不是单独的峰,而且走一走基线会向上漂移。
下面是我的液相图,第一张是我的样品图,6号峰是我的样品峰,第二张图是样品和标准品的比对图,条件是乙腈和水梯度走,流速0,25ml/min,走40min。求各位相关专业人士给予建议,不胜感激!

小妹求助各路大神液相分离条件的问题~~不胜感激~~
图片1.png


小妹求助各路大神液相分离条件的问题~~不胜感激~~-1
图片2.png
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

txq5346382

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
流速太低了,换甲醇和水梯度试试看
4楼2015-08-03 22:39:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

猫猫爱吃小鱼

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一个试着调整流速,看流速的调整对出峰的影响是什么,如果在不调整流动相条件下流速调高出峰的分离度是否有变化,是变大还是变小,然后再试着调一个合适的流速,第二个试着调整梯度的浓度比和梯度时间区间,方法的摸索就是比较和摸索的过程,另外实在不行,也可考虑换个相适应的色谱柱
5楼2015-08-04 15:32:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

萌萌的怪阿姨

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉你的样品杂质太多,影响你的物质峰,建议加一步前处理,净化样品。然后梯度可能要再优化一下。
13楼2015-08-06 10:41:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuhaifen

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用梯度走,基线上飘是很正常的;建议你查查文献或着调节流动相的比例,和你所选用的色谱柱也有一定的关系。
3楼2015-08-03 20:48:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenenli

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这个基线飘的也太厉害了吧!可以试着调梯度洗脱程序,你选择的流速太低了,峰分不开,可以试试0.8或1ml/min

[ 发自小木虫客户端 ]
11楼2015-08-05 12:03:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

niu0520322

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
流动相比例多少啊,基线飘的话,先走一针流动相做基线,再扣除去,有一个键可以扣除的

[ 发自小木虫客户端 ]
12楼2015-08-05 13:28:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

天空下的傻瓜

铁杆木虫 (知名作家)

来自猩猩的我

加甲醇等度走

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
众人皆醉,惟我独醒,就此沉沦,人称睡神。
2楼2015-08-03 19:12:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1032368883

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
试着调一下流动相的比例,可能会达到你要的分离效果
6楼2015-08-04 15:38:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kongximan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 猫猫爱吃小鱼 at 2015-08-04 15:32:16
第一个试着调整流速,看流速的调整对出峰的影响是什么,如果在不调整流动相条件下流速调高出峰的分离度是否有变化,是变大还是变小,然后再试着调一个合适的流速,第二个试着调整梯度的浓度比和梯度时间区间,方法的 ...

流速变慢,分离度会好一点,时间我是这改变,但是梯度浓度比应该多少为好呢?
7楼2015-08-04 20:27:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
物质性质相似,三点建议:
1、条件允许,换换色谱柱
2、使用净化方法
3、PDA是话,使用波长排除法
8楼2015-08-04 21:15:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18856096110

新虫 (初入文坛)

你好,我也准备做这方面的东西,我想请问一下怎么样才能把细菌上清液中的HSL浓缩,因为我是做他对另一种菌的影响,而我觉得浓度不够。谢谢!

[ 发自小木虫客户端 ]
努力做更好的自己,过更精彩的生活
9楼2015-08-05 01:20:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kongximan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 18856096110 at 2015-08-05 01:20:27
你好,我也准备做这方面的东西,我想请问一下怎么样才能把细菌上清液中的HSL浓缩,因为我是做他对另一种菌的影响,而我觉得浓度不够。谢谢!

旋蒸浓缩

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
10楼2015-08-05 11:10:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kongximan 的主题更新
信息提示
请填处理意见