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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 扩繁大肠杆菌的LB加氨苄液体培养基中，氨苄过期，过夜之后，提取的质粒效果不好
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yingmeiqi

新虫 (小有名气)

[求助] 扩繁大肠杆菌的LB加氨苄液体培养基中，氨苄过期，过夜之后，提取的质粒效果不好 已有5人参与

如题，已经提取了质粒，进行了菌液PCR检测，发现有我需要的条带，但是才发现氨苄是已经失效的，担心有杂菌混入，影响提取的质粒效果，请问大家，我得到的这个质粒，能不能用新配的LB加氨苄固体培养基进行第二次转化，那么这种情况下，得到的新鲜菌液提取到的质粒还会受到杂菌的干扰和影响吗？谢谢大家的帮助
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1楼 2015-08-03 09:50:41
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以这样做，氨苄很不稳定，新配的也不要培养时间过长
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2015-08-03 16:36:40
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十比

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用羧苄会好一点，一般抗氨苄的都抗羧苄。
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3楼2015-08-04 08:19:19
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673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
最好不要，如果混入杂菌后续实验很麻烦的，倒时候从新开始费时费力，建议从开始就保证准确
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4楼2015-08-04 08:28:22
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renjiahenma

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以用氨苄板进行四区划线纯化，然后再挑取单菌落进行培养，就可以获得纯化的重组菌了，就可以进行抽质粒。
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火把倒下，火焰依然向上。
5楼2015-08-04 19:15:08
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
大肠生长很快，Amp失效，质粒在没抗性条件下容易丢失，浓度不高。一般不会有杂菌或其他质粒，肯定可以。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2015-08-04 19:16:13
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