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yingmeiqi

新虫 (小有名气)

[求助] 扩繁大肠杆菌的LB加氨苄液体培养基中,氨苄过期,过夜之后,提取的质粒效果不好 已有5人参与

如题,已经提取了质粒,进行了菌液PCR检测,发现有我需要的条带,但是才发现氨苄是已经失效的,担心有杂菌混入,影响提取的质粒效果,请问大家,我得到的这个质粒,能不能用新配的LB加氨苄固体培养基进行第二次转化,那么这种情况下,得到的新鲜菌液提取到的质粒还会受到杂菌的干扰和影响吗?谢谢大家的帮助
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以这样做,氨苄很不稳定,新配的也不要培养时间过长
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2015-08-03 16:36:40
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十比

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用羧苄会好一点,一般抗氨苄的都抗羧苄。
3楼2015-08-04 08:19:19
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673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
最好不要,如果混入杂菌后续实验很麻烦的,倒时候从新开始费时费力,建议从开始就保证准确
4楼2015-08-04 08:28:22
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renjiahenma

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以用氨苄板进行四区划线纯化,然后再挑取单菌落进行培养,就可以获得纯化的重组菌了,就可以进行抽质粒。
火把倒下,火焰依然向上。
5楼2015-08-04 19:15:08
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
大肠生长很快,Amp失效,质粒在没抗性条件下容易丢失,浓度不高。一般不会有杂菌或其他质粒,肯定可以。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2015-08-04 19:16:13
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