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冻存的肝组织，提蛋白加裂解液之前，放在冰上5分钟，会不会使磷酸化蛋白去磷酸化？
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如题，提取小鼠肝脏组织的总蛋白，目的是做磷酸化蛋白的western blot. 从-80度冰箱取出样品后放在液氮中，将样品取出约50 mg于预冷的离心管中后，再扔入液氮中。 去配RIPA裂解液的时候，师弟将液氮中的样品全部取出插在了冰上，我回来的时候，感觉样品中的液氮已经挥发光了，赶紧加入了蛋白裂解液（里面有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂），这个过程大约有五六分钟。 加裂解前，样品在冰上的这段时间，会使肝组织中的磷酸化蛋白去磷酸化吗？ 希望有经验的前辈多多指导，感谢！ |
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