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yaoxuechun

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[求助] 皂苷类化合物代谢研究样品前处理蛋白沉淀已有1人参与

我是做细胞实验的，想用高效液相检测一下拟人参皂苷在细胞内的含量。样品前处理这部分不太懂，请大家给个意见，最好是具体点的处理步骤。
重点：该用哪种试剂既能沉降蛋白，又不会影响到皂苷类化合物的结构？我的化合物是奥克梯隆型三萜皂苷。

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1楼 2015-08-01 21:20:38

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yaoxuechun

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 零余子 at 2015-08-04 16:32:06
这个啊，你应该有它的结构吧，一般来说酸稳定的话，可以用酸沉淀蛋白，8000转离心，取上清然后有机溶剂萃取（常用乙酸乙酯）吹干，复溶，12000转离心，上清进样。还有一种常用方法就是加甲醇、乙腈等有机溶剂沉蛋白 ...

加甲醇沉蛋白后不需要再萃取什么的，离心后直接进样就可以了是吗？离心也是12000转吗，大约离心多久呢？