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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 皂苷类化合物代谢研究样品前处理蛋白沉淀
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yaoxuechun

金虫 (小有名气)

[求助] 皂苷类化合物代谢研究样品前处理蛋白沉淀 已有1人参与

我是做细胞实验的，想用高效液相检测一下拟人参皂苷在细胞内的含量。样品前处理这部分不太懂，请大家给个意见，最好是具体点的处理步骤。
重点：该用哪种试剂既能沉降蛋白，又不会影响到皂苷类化合物的结构？我的化合物是奥克梯隆型三萜皂苷。
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1楼 2015-08-01 21:20:38
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零余子

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yaoxuechun: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢，很有帮助。 2015-08-07 22:21:40
这个啊，你应该有它的结构吧，一般来说酸稳定的话，可以用酸沉淀蛋白，8000转离心，取上清然后有机溶剂萃取（常用乙酸乙酯）吹干，复溶，12000转离心，上清进样。还有一种常用方法就是加甲醇、乙腈等有机溶剂沉蛋白，直接离心，取上清进样，这种方法内源性物质会多一些，但操作简单
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努力就是屁股粘在椅子上
2楼2015-08-04 16:32:06
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yaoxuechun

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 零余子 at 2015-08-04 16:32:06
这个啊，你应该有它的结构吧，一般来说酸稳定的话，可以用酸沉淀蛋白，8000转离心，取上清然后有机溶剂萃取（常用乙酸乙酯）吹干，复溶，12000转离心，上清进样。还有一种常用方法就是加甲醇、乙腈等有机溶剂沉蛋白 ...

加甲醇沉蛋白后不需要再萃取什么的，离心后直接进样就可以了是吗？离心也是12000转吗，大约离心多久呢？
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3楼2015-08-07 22:25:59
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