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feehy金虫 (小有名气)
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[交流]
关于测序的问题
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| 小弟弱弱的问下，什么是双向测序，引物如何设计?多谢各位了。 |
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reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
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4楼2008-08-13 13:08:27
★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):thx
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DNA是两条互补序列，单向测序就是从一个方向测，也就是直接得到一条链的序列；双向测就和PCR一样是分别根据两条链的5'端扩增而测序，得到两条链的序列。 一般来说，在没有特殊要求的情况下，上海生工这样的测序公司的测序结果在800个核苷酸内是非常可靠的，1000个核苷酸内相对可靠，1200以后都只能做参考了。 因此，如果你的基因序列在1500个左右，你从一个方向测定的结果就不能准确判断后面500-700核苷酸序列的正确与否，就需要另一个方向也测，然后把两个结果分别取其可靠的部分综合判断 至于测序的引物，如果你是连接在常用的载体上的，只需要告诉公司你连接的载体是什么，公司有相应的通用引物的，如果你连接到其它一些公司没有相应测序引物的载体上，就需要提供引物序列，最好是你扩增基因的PCR引物序列，这样能保证把你的序列都包含在内 说了这么多，不知道说清楚没有，希望能对你有所帮助 |
2楼2008-08-13 09:42:50
feehy
金虫 (小有名气)
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3楼2008-08-13 09:51:52
5楼2008-08-14 10:47:17