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zeroon

木虫 (正式写手)

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[求助] 启动子和编码序列中间多了十几个碱基序列，影响蛋白的表达吗已有4人参与

情况是这样的，我在真菌里面表达一个蛋白，在构建载体的时候，启动子和编码区中间多了十几个碱基序列。现在已经转入真菌了，但不知道蛋白表达了没有。先检测了mRNA，发现是有的。但是现在蛋白到底有没呢？
启动子和编码区中间插入的十几个碱基，会影响蛋白的表达吗？

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1楼 2015-07-31 23:10:32

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zeroon

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引用回帖:

8楼: Originally posted by 我欲乘风归去 at 2015-08-02 09:37:00
你说的启动子是载体上自带的还是你要把启动子和编码序列一起克隆连接到你的表达载体上？如果是后者，没关系，如果是前者，你就要注意可能会它本身就会从某个区段表达，你注意看下图谱。...

我用的启动子是个未知的家伙，就是已知的一个基因的左臂，拿来直接作为启动子用了。现在我想用这段序列作为另一个蛋白基因的启动子，所以要把这两段连接起来，想用融合PCR连接，但是觉得不保险，还是想用酶切位点连接。所以就有了开始的问题。