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zeroon

木虫 (正式写手)

[求助] 启动子和编码序列中间多了十几个碱基序列,影响蛋白的表达吗 已有4人参与

情况是这样的,我在真菌里面表达一个蛋白,在构建载体的时候,启动子和编码区中间多了十几个碱基序列。现在已经转入真菌了,但不知道蛋白表达了没有。先检测了mRNA,发现是有的。但是现在蛋白到底有没呢?
启动子和编码区中间插入的十几个碱基,会影响蛋白的表达吗?
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zeroon

木虫 (正式写手)

引用回帖:
15楼: Originally posted by ppppppppp at 2015-08-11 21:39:22
我觉得还是有影响的,毕竟核糖体结合到rbs后还得移动到起始密码子上才能翻译,中间的几个碱基的万一形成什么发夹,可能就把核糖体的移动阻碍了。

天哪。。。那启动子该如何预测呢,我们实验室拿的的启动子,实际上就是一个基因的上游序列,我始终怀疑这个启动子的性能
16楼2015-08-12 11:22:40
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zeroon

木虫 (正式写手)

现在能应助的大神越来越少了
2楼2015-08-01 10:55:39
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-04 22:47:10
启动子序列从最近的ATG开始识别,如果你的那段十几bp有ATG,会有影响。如果没有就没有关系。
。
4楼2015-08-01 11:12:01
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zeroon

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 我欲乘风归去 at 2015-08-01 11:12:01
启动子序列从最近的ATG开始识别,如果你的那段十几bp有ATG,会有影响。如果没有就没有关系。

我想重新构建表达载体,如果在启动子到编码序列间加几个酶切位点,并且没有ATG这样的。是不是就没有问题了?
5楼2015-08-01 13:10:42
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