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csyhaoge

银虫 (正式写手)

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专业: 环境微生物学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
laozuzunzhe: 金币+3, MicEPI+1, 鼓励热心应助！ 2015-08-04 14:34:03

引用回帖:

3楼: Originally posted by jinshengfang at 2015-07-31 12:04:45
不是的，平板上的时间是我倒平板的时间，这个平板式过夜培养的。
我做的噬菌斑也没有那么复杂，我就涂了一块平板，等平板干后，在1、2、3、4这几个点处点上我的发酵液（发酵液之前出现发酵异常，怀疑是噬菌体所致 ...

嗯~
大肠杆菌BL21（DE3）的基因型为F– ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3 [lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5])，该菌株是以T7 RNA聚合酶为表达系统的外源基因蛋白高效表达的宿主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的插入到λ噬菌体DE3区，其表达受该区域lacUV5启动子调控，该区整合在BL21染色体上，BL21（DE3）适合表达非毒性蛋白。
想来你们应该是用该菌株进行大规模的发酵生产。通过你说的，个人判断应该是：1、发酵液受到了噬菌体的污染（你的点板实验可以验证培养液中是否含有该菌株的噬菌体）2、该噬菌体污染应该是来自外界的烈性噬菌体（也许是来自空气中噬菌体的污染，也可能是培养基灭菌不彻底使之含有噬菌体），BL21(DE3）基因组中虽然含有λ噬菌体基因，但其基本不会裂解形成噬菌斑的。3、涂布平板上形成的噬菌斑中央出现了菌落，不能说明形成该菌落的菌是溶原性的，原因第一条回复我已经说了。
希望能对你有所帮助~
祝实验顺利~

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4楼2015-08-01 10:18:44

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