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shineedward

新虫 (初入文坛)

[求助] 在大肠杆菌中,最多同时存在几种不同的质粒?(假设相容) 已有3人参与

问题:1. 本人做科研不久,请教各位前辈,往大肠杆菌中转质粒的时候,每次转一种,最多能转几种进去呢(如果假设全部相容的话),会不会转的多了对菌产生负担?
背景:本人希望在大肠中引入许多不同的基因,但是发现引入携带三个基因的两个质粒的时候,菌长得很慢很慢,如果想将质粒上的基因整合到染色体组上,应该用什么办法呢?有相应的protocol吗?
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匿名

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感谢参与,应助指数 +1
shineedward(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-31 22:08:42
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5楼2015-07-30 13:22:01
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
shineedward(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-07-31 22:08:14
首先要清楚一点:引入多个基因的目的是什么?
因为一般采用原核表达体系是为了能够获取具有活性的可溶性表达蛋白,所以一般只会导入一个质粒。如果导入的质粒过大或是过多,很有可能会无法表达出蛋白,或是表达的蛋白为不可溶的包涵体,所以不建议在大肠杆菌中加入多个载体。
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
2楼2015-07-29 09:40:24
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shineedward

新虫 (初入文坛)

您好,其实就是想要过表达1~3个基因
3楼2015-07-29 10:25:08
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匿名

用户注销 (正式写手)

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4楼2015-07-30 13:19:53
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