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t7929

铜虫 (初入文坛)

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[求助] RT-PCR出来的曲线特别杂乱，一点也不平滑是哪里出了问题，急！在线等！已有1人参与

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1楼 2015-07-28 15:48:21

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

a314919473

银虫 (著名写手)

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专业: 基因组学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

最简单的方法就是电泳检测下，看下扩增产物是不是你想要的。
目测是非特异扩增，原因很多：
1.扩增子的大小是不是在80-250bp之间；
2.cDNA或者DNA是不是浓度过高，一般我们做都是拿原液直接稀释8-10被左右进行扩增；
3.程序给出来，看下是不是程序错误
4.仪器和试剂是不是配套，目测仪器是伯乐的，试剂方面ROX比例，因为每个仪器对应的ROX含量不一样，请确认
5.你的求助也太简单了吧，具体点才能准确回答，你用的什么，怎么做的能多清楚就多清楚，你这真不知道怎么回答你。。。

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有你真好

2楼2015-07-30 13:55:48