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却与琉璃

新虫 (初入文坛)

[求助] 拟南芥浸花法转化步骤 已有2人参与

浸花法转拟南芥,总是没什么阳性苗
                                                  求拟南芥浸花法转化的buffer及浓度(最后不用MS的),要不要加AS,加多少,什么时候可以转化,转化时间,转化次数,转化后要不要浇水,盖黑色的薄膜,种子要不要消毒等详细步骤?
                                                   一定要是自己用过的效率高的转化方法!
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快乐的
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wx1308897716

木虫 (小有名气)

神虫

也要做这个,不过实验卡住了,不知道到什么时候在做,也是菜鸟一枚
2楼2015-07-29 09:54:39
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bigvally

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没养性苗也不一定就是转化的问题吧,首先要确定你的构建转农杆菌没问题。菌体活化后的OD值比较重要,1.2左右,用MS调到0.8左右吧,然后转化的前两天提前打打顶,憨包未放你懂得?
3楼2015-07-29 17:26:23
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yvonne9044

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

侵染的时候带花的都要去掉,我也觉得你应该再检查一下你的菌株!
4楼2015-09-12 15:52:18
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naringenin

新虫 (小有名气)

这个方法还没有普及么?
5楼2015-09-13 16:10:15
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