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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 测序结果会有不对的时候吗
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zrk25

木虫 (小有名气)

[交流] 测序结果会有不对的时候吗 已有11人参与

今天拿到测序结果，比对发现根本不对，于是做了菌液Pcr发现有自己要的基因的条带，会不会是测序错了？有别的原因吗？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2015-07-28 00:09:44
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199006287956

木虫 (著名写手)
★
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做模板的DNA被出发的菌珠的DNA污染，导致目的基因混杂，测序失败。最近做的单位点突变，也需要测序，最可怕的就是污染出发菌珠。

[ 发自小木虫客户端 ]
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追求不惜，奋斗不息
6楼2015-07-28 10:52:00
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★
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测序出错的可能不大，菌液PCR经常也会出现假阳性，建议你先通过通用引物PCR、酶切等方法排除自己的问题。
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2楼2015-07-28 00:33:11
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a86052

金虫 (正式写手)
★
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测序有出现错误的时候，但是一般是个别的突变什么的，很少出现完全不对的情况~正如楼上所言，菌夜PCR假阳性是不可忽视的问题~
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3楼2015-07-28 09:04:19
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远望集团

金虫 (正式写手)
★
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既然做菌液Pcr发现有自己要的基因的条带，如果可以的话，把条带切胶回收、纯化，然后以此为模板做PCR，如果是单一的符合大小的条带，拿这个去测序看看。
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只要努力，一切皆有可能！更美的风景在那片更高的天空。。。
4楼2015-07-28 10:25:45
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