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着急呀，高效液相问题，请高人指点一二呀 已有6人参与
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本人最近在用高效液相色谱测黄酮，色谱条件是：A甲醇 B 0.1%甲酸水溶液 流速：0.3ml/min 进样量：5微升 柱温：30℃ 梯度条件为：0-20min：80-40%B 20-30min: 40-80B。无奈出现的峰不理想，也试过其他一些梯度，但是前边的峰都分不开，拜托大家指点指点。 IMG_20150726_211731.jpg |
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2楼2015-07-26 22:42:19
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lvlingzhu: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-07-30 22:16:38
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lvlingzhu: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-07-30 22:16:38
| 我曾经也做过黄酮的液相，个人建议，你把0~5min保持95%B，这样做能够使极性大的杂质很快出峰，不影响后面黄酮的测定，还有就是提高甲酸的浓度，酸度越高越利于黄酮类物质在反相柱里面保留，保留时间越长，则越容易分开，我以前用的是冰醋酸，不行你也可以用冰醋酸试试。还有就是哪段时间峰比较集中，你就把哪段时间的梯度变化快一些，我的经验是梯度变化越快越容易使分不开的成分分开，还有就是你的流速是不是太慢了一点？另外，如果以上这些还不能解决你的问题，建议你重新购买一根新柱子试试，不要用国产的保护柱，柱子买安捷伦或者其他好牌子的。希望对你有所帮助，祝好！ |
6楼2015-07-30 10:38:09
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