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seeker91
★
午夜魔兰: 金币+1 2015-07-27 16:21:53
祝福祝福
11楼2015-07-27 10:21:49
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午夜魔兰

银虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by lxzk at 2015-07-27 10:06:09
尿素浓度多少？上样前最好做一下变性，另外上样量不是看浓度，是看总量，我一般上100ng，更多也可以，染色效率也跟序列有关系。

4.2g尿素，2ml TBE，3ml水，5ml 40%丙烯酰胺，再就是90uL 10% aps和8ul TEMED
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12楼2015-07-27 14:13:38
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午夜魔兰

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 小泓杨 at 2015-07-26 08:54:13
我原先做的时候也是批不出来。但是marker还在那里，它比较抗造，就是它最容易留下印记。电压一般范围就可以，你原先用什么电压，就用什么电压，稍微调调也可以，这个没有讲究。

后来怎么做出来的
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13楼2015-07-27 14:15:21
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xieruobing
★
午夜魔兰: 金币+1 2015-07-27 16:21:56
14楼2015-07-27 14:24:54
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lxzk

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by 午夜魔兰 at 2015-07-27 14:13:38
4.2g尿素，2ml TBE，3ml水，5ml 40%丙烯酰胺，再就是90uL 10% aps和8ul TEMED...

那就是7M尿素，浓度没有什么问题，不过最好后加水补到10ml，直接加3ml水总体积会超过去。那你注意一下上样前变性，再确定一下样品没有降解，应该问题不大。如果实在染不出来，可以考虑化学标记(生物素或者地高辛)或者同位素(磷32)标记，太短的单链DNA有时候就是不好染，你可以把marker也变性一下再跑。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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15楼2015-07-27 19:18:36
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Linda66

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
跑的时间太久了，我之前也跑过，十几个碱基的，跑半个小时，就可以了，设置的电流是6mV
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16楼2015-10-29 10:08:46
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nomoonsky

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，你这个可以用于聚丙烯酰胺的marker 是在哪里购买什么型号的？ 买回来需要进一步处理吗？还是可以直接添加使用？
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17楼2017-11-23 15:11:57
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