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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 大片段NRPS基因的异源表达
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shw_zhang

新虫 (初入文坛)

[求助] 大片段NRPS基因的异源表达 已有2人参与

我有个从霉菌来的NRPS基因，片段大小是19.5kbp. 我已经通过基因敲除的方式证明该基因负责产我要的目标化合物。现在我又通过重组把该基因连接到了一个酵母表达载体（pXW55)里进行表达。但是并没有看到我想要的产物。各位做过NRPS的战友，还有什么建议吗？多谢。
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天然产物，天然产物的生物合成
1楼 2015-07-23 00:17:53
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shanliwademen

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
shw_zhang(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-07-24 10:27:59
我这么说吧，你克隆的片段只是你目标产物表达的必要不充分条件，因此在酵母中是不会表达的，估计你是做抗生素的，介意你用生物信息学的手段把基因蔟搞清，然后设计引物做大片段克隆

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2楼2015-07-23 01:52:36
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shanliwademen

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

要不把你的菌株和克隆片段给我，还有你抗生素结构界定结果，我帮你分析设计引物

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2015-07-23 01:54:33
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by shanliwademen at 2015-07-23 01:54:33
要不把你的菌株和克隆片段给我，还有你抗生素结构界定结果，我帮你分析设计引物

人家还没做完的东西，你就想贪啊，拿去自己做？怎么可能给你菌株，想的太美了

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4楼2015-07-23 07:01:34
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shanliwademen

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by biosci at 2015-07-23 07:01:34
人家还没做完的东西，你就想贪啊，拿去自己做？怎么可能给你菌株，想的太美了
...

以小人之心度君子之负

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2015-07-23 18:16:51
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yghboy168

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

NRPS基因簇的完整性；前体相关基因是否齐全；密码子是否需要重新优化
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眼内有尘三界窄，心头无事一床宽！
6楼2015-08-24 19:15:58
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