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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 跑PAGE蛋白胶
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玲林123

金虫 (初入文坛)

[求助] 跑PAGE蛋白胶 已有3人参与

最近做在做western，可是跑胶上样这一步出现问题，上样孔里总是有小的胶体在里面，导致我上样上不进去，我想问一下这会是什么原因，我把梳子洗干净了，应该不是梳子的问题。还有显影发现我的内参没有条带，我的蛋白条带比较深，很疑惑。麻烦内行帮忙分析分析，不胜感激！
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1楼 2015-07-22 20:00:54
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ghqiu09

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
2楼2015-08-10 20:35:01
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

应该是样品没处理好吧，自建看文献吧或许能够帮到你
http://www.detaibio.com/material-downloads.html
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
3楼2015-08-11 13:51:08
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sy0714541

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

应该是胶没有配好，你的TEMED 量多加一点试试，同时浓缩胶凝的时间可以延长到1h！ 显影的问题，可能是你因为你的内参失效了，你可以同时跑两块胶，一块做烤染，一块胶做WB；或是你的内参上样量太少，而样品上样太多，导致曝光时间很短的时候，内参由于浓度太低无法用肉眼辨别，内参一般上样100ng，同时你也要减少样品的上样量！
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浦东新区从事生物医药研发，小硕一枚
4楼2015-08-11 14:16:32
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