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玲林123

金虫 (初入文坛)

[求助] 跑PAGE蛋白胶 已有3人参与

最近做在做western,可是跑胶上样这一步出现问题,上样孔里总是有小的胶体在里面,导致我上样上不进去,我想问一下这会是什么原因,我把梳子洗干净了,应该不是梳子的问题。还有显影发现我的内参没有条带,我的蛋白条带比较深,很疑惑。麻烦内行帮忙分析分析,不胜感激!
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ghqiu09

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

2楼2015-08-10 20:35:01
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

应该是样品没处理好吧,自建看文献吧或许能够帮到你
http://www.detaibio.com/material-downloads.html
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
3楼2015-08-11 13:51:08
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sy0714541

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

应该是胶没有配好,你的TEMED 量多加一点试试,同时浓缩胶凝的时间可以延长到1h! 显影的问题,可能是你因为你的内参失效了,你可以同时跑两块胶,一块做烤染,一块胶做WB;或是你的内参上样量太少,而样品上样太多,导致曝光时间很短的时候,内参由于浓度太低无法用肉眼辨别,内参一般上样100ng,同时你也要减少样品的上样量!
浦东新区从事生物医药研发,小硕一枚
4楼2015-08-11 14:16:32
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