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蛋白质定位关于GFP荧光分析的若干问题。 已有1人参与
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分子生物学新手，请教 问题一：蛋白质结构预测方便易入的平台链接，或者软件？ 问题二：在烟草细胞中做亚细胞定位，不经过原生质体分离，要如果观察烟草液泡定位蛋白？ 在叶背细胞和保卫细胞中液泡的分布是怎么样？ 问题三：附某次实验的荧光及明场merge图，请教其定位的位置。（做了质壁分离。图片分别为质壁分离后和分离以前）。 跪求高手指点  CEP2定位（质壁分离后）.jpg  CEP2定位（质壁分离前）.jpg |
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2楼2015-09-07 14:47:23
starseacow
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【答案】应助回帖
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648949632: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-11-25 09:07:14
648949632: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-11-25 09:07:14
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1 http://www.sbg.bio.ic.ac.uk/phyre2/html/page.cgi?id=index 2 不做原生质体或质壁分离，不容易观察液泡，除非你耐心点在生长旺盛的细胞处观察类似质壁分离的现象。不过依旧很难和ER上的表达区分开来。最好的办法是同时表达一个定位标记marker以辅助判断。另外，观察液泡，可能比较好的材料是根毛尖端，在拟南芥上有这么做的。 3 你展示的图看上去很奇怪，质壁分离前我看不到GFP信号，分离后的信号看上去也有可能是自发荧光或别的什么干扰。楼主还需要优化显微镜设置。 |
3楼2015-09-08 22:16:21
4楼2015-09-09 00:10:55
5楼2015-11-25 09:01:42
25
