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648949632

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质定位关于GFP荧光分析的若干问题。 已有1人参与

分子生物学新手,请教
问题一:蛋白质结构预测方便易入的平台链接,或者软件?
问题二:在烟草细胞中做亚细胞定位,不经过原生质体分离,要如果观察烟草液泡定位蛋白?
                  在叶背细胞和保卫细胞中液泡的分布是怎么样?
问题三:附某次实验的荧光及明场merge图,请教其定位的位置。(做了质壁分离。图片分别为质壁分离后和分离以前)。

跪求高手指点

蛋白质定位关于GFP荧光分析的若干问题。
CEP2定位(质壁分离后).jpg


蛋白质定位关于GFP荧光分析的若干问题。-1
CEP2定位(质壁分离前).jpg
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miles袁

新虫 (初入文坛)

题主,你是拿什么条件做质壁分离的
2楼2015-09-07 14:47:23
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
648949632: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-11-25 09:07:14
1 http://www.sbg.bio.ic.ac.uk/phyre2/html/page.cgi?id=index
2 不做原生质体或质壁分离,不容易观察液泡,除非你耐心点在生长旺盛的细胞处观察类似质壁分离的现象。不过依旧很难和ER上的表达区分开来。最好的办法是同时表达一个定位标记marker以辅助判断。另外,观察液泡,可能比较好的材料是根毛尖端,在拟南芥上有这么做的。
3 你展示的图看上去很奇怪,质壁分离前我看不到GFP信号,分离后的信号看上去也有可能是自发荧光或别的什么干扰。楼主还需要优化显微镜设置。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
3楼2015-09-08 22:16:21
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lxc374

新虫 (小有名气)

买个QIAGEN试剂盒,试剂盒中的宝马

发自小木虫Android客户端
4楼2015-09-09 00:10:55
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648949632

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by miles袁 at 2015-09-07 14:47:23
题主,你是拿什么条件做质壁分离的

1M NaCL 30MIN
5楼2015-11-25 09:01:42
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