应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫实验 » 细胞免疫
111/2返回列表12下一页
查看: 1251  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

史密斯丹妮

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞免疫 已有1人参与

我做卵母细胞免疫时，目的蛋白应该是在卵母细胞膜上或透明带上表达，抗体结合后应该在卵母细胞膜或透明带上看到较规则的一圈绿色带。但是用共聚焦显微镜观察以后的实验结果是整个卵母细胞面都是绿色，呈现整个一个圆形的绿色平面。希望有高人指点出现这种结果的原因是什么，那些方面需要改进。急需帮助！谢谢！也希望提供一些指甲油封片的技巧。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-07-21 17:38:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

HTweiyi

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你有染核吗，
你清洗的干净吗，孵育二抗的时间和温度是不是没有控制好，
指甲油封片的话，在周围边缘涂一点就可以了
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-07-23 12:54:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HTweiyi

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 史密斯丹妮 at 2015-07-26 19:53:15
是的，我用0.1%曲拉通首先做了通透处理，后来再封闭的。但有的细胞还是完好的。您说卵母细胞那么脆弱，是不是洗涤时间和次数多了对它损伤也比较大？...

这个就不清楚了，你破膜的时候，可以室温下，时间短点，是不是不破膜也可以的，因为膜上都有孔道的
不需要来回洗涤的，只要浸泡几下就可以了
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2015-07-27 08:53:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HTweiyi

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这个是不是曲拉通把膜破坏的厉害了，你可以试试不破膜
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2015-07-29 10:30:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

史密斯丹妮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by HTweiyi at 2015-07-23 12:54:28
你有染核吗，
你清洗的干净吗，孵育二抗的时间和温度是不是没有控制好，
指甲油封片的话，在周围边缘涂一点就可以了

首先很感谢。我染核了。因为卵母细胞比较脆弱，所以洗的时间不是很长。二抗孵育时间很温度最好多少呢？我封片时，抗淬灭剂老是从片子下面跑出来怎么办啊，总是周围油乎乎的。望得到您宝贵的意见和建议。
赞一下 回复此楼
3楼2015-07-24 07:17:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HTweiyi

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

首先一般二抗的孵育是在37度的情况下，
封片时，可以在片子的周围涂上一层指甲油，四周的边缘就可以，这样的话会可以彻底封住，另外抗猝灭剂不要加的太多
赞一下 回复此楼
4楼2015-07-24 08:51:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

史密斯丹妮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by HTweiyi at 2015-07-24 08:51:29
首先一般二抗的孵育是在37度的情况下，
封片时，可以在片子的周围涂上一层指甲油，四周的边缘就可以，这样的话会可以彻底封住，另外抗猝灭剂不要加的太多

观察的时候总是一些卵母细胞会长个辫子或者带个尾巴，它们也是绿色的，好像是胞质溢出了，是不是就相当于细胞碎了，是不是抗荧光淬灭剂放少了？另外，您觉得一抗37度孵育一小时和4度过夜有区别吗？谢谢。
赞一下 回复此楼
5楼2015-07-24 22:28:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HTweiyi

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你是不是用曲拉通破膜了
一抗的孵育，我还是感觉4度过夜比较好，二抗可以37度孵育一小时
赞一下 回复此楼
6楼2015-07-26 11:44:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

史密斯丹妮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by HTweiyi at 2015-07-26 11:44:26
你是不是用曲拉通破膜了
一抗的孵育，我还是感觉4度过夜比较好，二抗可以37度孵育一小时

是的，我用0.1%曲拉通首先做了通透处理，后来再封闭的。但有的细胞还是完好的。您说卵母细胞那么脆弱，是不是洗涤时间和次数多了对它损伤也比较大？
赞一下 回复此楼
7楼2015-07-26 19:53:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

史密斯丹妮

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by HTweiyi at 2015-07-27 08:53:12
这个就不清楚了，你破膜的时候，可以室温下，时间短点，是不是不破膜也可以的，因为膜上都有孔道的
不需要来回洗涤的，只要浸泡几下就可以了...

麻烦您最后能帮我看看这个实验结果，分析分析原因吗？整个面是绿色的，本来应该只是外面一圈
细胞免疫
20150728_192302.jpg


细胞免疫-1
20150728_192308.jpg


细胞免疫-2
20150728_202331.jpg
赞一下 回复此楼
9楼2015-07-28 21:12:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 史密斯丹妮 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 01:21 by mibUvS8DDCwf
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 00:21 by mibUvS8DDCwf
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-14 23:57 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-14 23:45 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 3/150 2026-09-14 23:21 by vZfe6xYu34yj
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-14 22:37 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 3/150 2026-09-14 22:33 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 3/150 2026-09-14 22:24 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:13 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:12 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:00 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:33 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:24 by vZfe6xYu34yj
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +4 两三岁ss 2026-09-14 4/200 2026-09-14 20:29 by 班主任的同桌
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-14 18:01 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭