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xiefl1984

木虫 (小有名气)


[交流] 请教:质粒提取后的浓度如何测?

1.5ml高拷贝质粒经酶切,50ul双蒸水溶解后,还能用紫外测其浓度吗?能的话具体如何操作呢?其OD值估计又是多少呢?请各位高手不吝赐教!

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-14 at 10:29 ]
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xiefl1984

木虫 (小有名气)


谢谢 chysx6的回复
3楼2008-08-08 14:35:30
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chysx6

铁杆木虫 (小有名气)

★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
不用这么麻烦
找个普通的DNA marker定一下量已经能基本上定出量了

正常1.5ml菌柱提高拷贝质粒可以提出1-2ug质粒
手提可以达到1ug

不知楼主说的“1.5ml高拷贝质粒经酶切,50ul双蒸水溶解后”是怎样的操作
是指胶回收后用50ul水溶吗?请写明
如果回收的片段,无非是想向下做连接
没必要作紫外定量,找个DNA marker看一下就可以满足你的需要了
2楼2008-08-07 22:15:29
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kaoyan1230

金虫 (小有名气)


xyklmu(金币+1,VIP+0):很方便快捷的一个测量方法
不知道你们实验室有没有一个叫做“NANO DROP”的仪器,用这个可以直接测量的,很方便
4楼2008-08-08 18:53:03
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xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界

这个Nano DROP的仪器我用过,是非常方便的,待测样品用量1ul,立刻出浓度,也是比较准确的一种测定质粒浓度的方法。
即使没有这种仪器,其实一般的紫外分光光度计也是可以的。结合电泳的方法,现在大都用浓度已知的Marker,基本上很容易搞清质粒的浓度。
位卑未敢忘忧国。
5楼2008-08-10 03:22:21
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