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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教：质粒提取后的浓度如何测？
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xiefl1984

木虫 (小有名气)

[交流] 请教：质粒提取后的浓度如何测？

1.5ml高拷贝质粒经酶切，50ul双蒸水溶解后，还能用紫外测其浓度吗？能的话具体如何操作呢？其OD值估计又是多少呢?请各位高手不吝赐教！

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-14 at 10:29 ]
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1楼 2008-08-07 21:54:32
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chysx6

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):谢谢分享，欢迎常来
不用这么麻烦
找个普通的DNA marker定一下量已经能基本上定出量了

正常1.5ml菌柱提高拷贝质粒可以提出1-2ug质粒
手提可以达到1ug

不知楼主说的“1.5ml高拷贝质粒经酶切，50ul双蒸水溶解后”是怎样的操作
是指胶回收后用50ul水溶吗？请写明
如果回收的片段，无非是想向下做连接
没必要作紫外定量，找个DNA marker看一下就可以满足你的需要了
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2楼2008-08-07 22:15:29
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xiefl1984

木虫 (小有名气)
谢谢 chysx6的回复
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3楼2008-08-08 14:35:30
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kaoyan1230

金虫 (小有名气)
★
xyklmu(金币+1,VIP+0):很方便快捷的一个测量方法
不知道你们实验室有没有一个叫做“NANO DROP”的仪器，用这个可以直接测量的，很方便
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4楼2008-08-08 18:53:03
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xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界
这个Nano DROP的仪器我用过，是非常方便的，待测样品用量1ul，立刻出浓度，也是比较准确的一种测定质粒浓度的方法。
即使没有这种仪器，其实一般的紫外分光光度计也是可以的。结合电泳的方法，现在大都用浓度已知的Marker，基本上很容易搞清质粒的浓度。
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位卑未敢忘忧国。
5楼2008-08-10 03:22:21
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