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huazhl1966

银虫 (小有名气)

[交流] 电泳出问题了!!

我的电泳跑出来几条连在一起的色带了,没有分离的现象。
注:SDS-PAGE电泳,分离蛋白质。最左边是MARK,只跑出一条带。
请各位大侠指点一下,究竟怎么回事呢?
附图片:

[ Last edited by huazhl1966 on 2008-8-7 at 14:56 ]
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TheGodlovestheonewhotrieshisbestoneverythingandhasstrongsenseofresponsibility!!!!
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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)


reasonspare(金币+1,VIP+0):thx
你的胶做的不好,是不是韧性很差啊?你用的多大的胶啊?凝聚正常吗?
2楼2008-08-07 15:42:26
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huazhl1966

银虫 (小有名气)

厚度是1.0mm的,聚合正常
TheGodlovestheonewhotrieshisbestoneverythingandhasstrongsenseofresponsibility!!!!
3楼2008-08-07 15:51:37
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
huazhl1966(金币+3,VIP+0):谢谢,继续帮忙哦
跑太久了(降解)或者buffer有问题(缓冲能力不够)~~
是不是跑完胶都热了?这种情况下条带很容易弥散
4楼2008-08-07 16:05:43
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huazhl1966

银虫 (小有名气)

不热呀,我们还是放在冰浴里的,分离胶缓冲液是新配的,还有个很奇怪,以前MARK跑了六条带,现在只剩下一条了
TheGodlovestheonewhotrieshisbestoneverythingandhasstrongsenseofresponsibility!!!!
5楼2008-08-07 16:10:37
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


xyklmu(金币+1,VIP+0):感谢答复,欢迎经常交流
电泳槽里头的buffer可能不行了
这种弥散现象给我的第一感觉就是降解了
6楼2008-08-07 16:14:57
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huazhl1966

银虫 (小有名气)

哦,那电泳中用到的所有试剂,有什么不能放太久的吗?我一般都是一次配一定量的溶液,就用一段时间。这样会不会有问题呢?
TheGodlovestheonewhotrieshisbestoneverythingandhasstrongsenseofresponsibility!!!!
7楼2008-08-07 16:21:28
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★
xyklmu(金币+4,VIP+0):感谢答复,欢迎经常交流
一般除了AP只能放一周之外,其他都可以放挺久的
但是如果出现了沉淀的话就一定要丢弃
虽然可以放挺久,但是最好还是别放太长时间
前几次电泳跑不好,我都是新配了所有的buffer就ok了
现在学乖了,每次配一点,够自己用就行~
反正,有的时候做实验要等n长时间,这段时间就拿来配溶液
倒也不觉得有多麻烦~~闲着也是闲着
8楼2008-08-07 16:28:12
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huazhl1966

银虫 (小有名气)

我今天就是新配的AP,30%丙烯酰胺溶液。其他的试剂都是二十几天前配的,都保存在4度冰箱里。
TheGodlovestheonewhotrieshisbestoneverythingandhasstrongsenseofresponsibility!!!!
9楼2008-08-07 16:35:53
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
huazhl1966(金币+3,VIP+0):谢谢,继续帮忙哦
二十几天似乎真的有点久了……
10楼2008-08-07 16:42:06
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