电泳出问题了！！ - 生物科学 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

TheGodlovestheonewhotrieshisbestoneverythingandhasstrongsenseofresponsibility!!!!

11楼2008-08-07 16:46:44

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huazhl1966

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你说样品缓冲液有没问题呢？我这些天一直放在外面，用白纸包着，有问题吗？

TheGodlovestheonewhotrieshisbestoneverythingandhasstrongsenseofresponsibility!!!!

12楼2008-08-07 16:54:48

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三磷酸腺苷

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呃？最好放4℃吧~~~放在外头没试过，但估计还是会有点影响
其实不用包着，因为除了PAGE的stock需要避光之外，其他都没有要求要避光
我感觉吧，如果用量不是很多，而自己又懒得每次都要称量
就拿几个瓶子，启用一瓶就加水溶解，不用的就保持其为粉末状态不溶解之
其实就是相当于外头有些商品，买回来是粉末，然后自己溶解一下
这些都是懒人的方法啦，呵呵
当然最好称量好但是没有溶解的粉末不要受潮
我一般习惯是，洗干净的瓶子都拿去烘干再拿出来用（塑料瓶就注意不要太高温烘烤）
商品化的液体培养基瓶子其实很好用，上面又有刻度，500ml的容积也不多不少

13楼2008-08-07 17:08:27

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huazhl1966

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呵呵，谢谢，我再做做看

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14楼2008-08-07 17:13:51

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snzydong

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你这个胶没有配好有问题

15楼2008-08-07 17:24:53

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小木壳

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是不是电泳时的电压太高了?
别灰心在做一次

16楼2008-08-07 18:37:54

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点样的量太多了，电压好像有点大！

17楼2008-08-12 12:34:11

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香菱儿

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好像是样品降解了

漫洒英雄泪，相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行？一任俺芒鞋破钵随缘化！

18楼2008-08-13 18:57:03

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wjswj

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试剂如果是新配的而且之前用过没有问题，那么二十天没什么大不了的，只要不发霉，继续用！running buffer母液放一年都可以用，照配方配好不用调PH，用时稀释即可。
首先确定样品没有问题，确定分离胶里加的是缓冲液切PH正确。
样品是否煮过变性？变性后应该简短离心，不要把黏糊糊的东西点进加样孔。确保都加SDS了。
减少点上样量。
从图上看，分离胶浓缩胶之间好像不平啊，也没有较齐的边界。是不是有漏液的现象。跑的过程中确保不漏缓冲液，要不然电路不通样品也会跑不好。

金币是赌出来的

19楼2008-08-14 10:36:34

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qfzhang

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1 marker很可能降解，
2 你的样品太浓了，或者样品中的某个蛋白含量太高，下次loading的时候量少一点。