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huazhl1966

银虫 (小有名气)

[交流] 电泳出问题了!!

我的电泳跑出来几条连在一起的色带了,没有分离的现象。
注:SDS-PAGE电泳,分离蛋白质。最左边是MARK,只跑出一条带。
请各位大侠指点一下,究竟怎么回事呢?
附图片:

[ Last edited by huazhl1966 on 2008-8-7 at 14:56 ]
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TheGodlovestheonewhotrieshisbestoneverythingandhasstrongsenseofresponsibility!!!!
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

★ ★ ★ ★ ★
xyklmu(金币+5,VIP+0):感谢答复,积极交流
试剂如果是新配的而且之前用过没有问题,那么二十天没什么大不了的,只要不发霉,继续用!running buffer母液放一年都可以用,照配方配好不用调PH,用时稀释即可。
首先确定样品没有问题,确定分离胶里加的是缓冲液切PH正确。
样品是否煮过变性?变性后应该简短离心,不要把黏糊糊的东西点进加样孔。确保都加SDS了。
减少点上样量。
从图上看,分离胶浓缩胶之间好像不平啊,也没有较齐的边界。是不是有漏液的现象。跑的过程中确保不漏缓冲液,要不然电路不通样品也会跑不好。
金币是赌出来的
19楼2008-08-14 10:36:34
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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)


reasonspare(金币+1,VIP+0):thx
你的胶做的不好,是不是韧性很差啊?你用的多大的胶啊?凝聚正常吗?
2楼2008-08-07 15:42:26
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huazhl1966

银虫 (小有名气)

厚度是1.0mm的,聚合正常
TheGodlovestheonewhotrieshisbestoneverythingandhasstrongsenseofresponsibility!!!!
3楼2008-08-07 15:51:37
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
huazhl1966(金币+3,VIP+0):谢谢,继续帮忙哦
跑太久了(降解)或者buffer有问题(缓冲能力不够)~~
是不是跑完胶都热了?这种情况下条带很容易弥散
4楼2008-08-07 16:05:43
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