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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于不同品牌marker的问题
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wangning-188

铜虫 (小有名气)

[交流] 关于不同品牌marker的问题

本人纯化了一种文献报道为12kd左右的蛋白，用bio-rad和 fermentas两家公司的标准蛋白做sds-page，结果发现形成的二聚体，两家标准蛋白分别做对照，对应的分子量为24和28k,怎么解释这个问题？
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1楼 2008-08-07 10:40:51
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
24kDa和28kDa本来就很难区分开来吧……基本上条带粗一点点就看不出来区别了
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2楼2008-08-07 10:44:24
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wangning-188

铜虫 (小有名气)
[quote]Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2008-8-7 10:44:
24kDa和28kDa本来就很难区分开来吧……基本上条带粗一点点就看不出来区别了 [/quote
我没说清楚啊，我是说形成的二聚体，一个marker对应过去为24k,二另一个对应过去为28k,想知道原因？
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3楼2008-08-07 10:48:00
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
wangning-188(金币+3,VIP+0):en
我的意思就是说
形成的二聚体，大小合理应该是24kDa，但是由于28kDa的marker实在和24kDa太接近了，所以就会觉得其实就在28kDa的位置上

另，该蛋白是否会形成异质二聚体呢？
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4楼2008-08-07 11:05:32
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hqhe

木虫 (正式写手)
我有一点不明白，做SDS-PAGE的时候蛋白应该是会被变性的吧，何来二聚体呢？
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5楼2008-08-07 12:40:46
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by hqhe at 2008/8/7, 12:40:
我有一点不明白，做SDS-PAGE的时候蛋白应该是会被变性的吧，何来二聚体呢？

有可能的，蛋白样品放太久就会出现一些古古怪怪的东西
所以有时候上样之前要沸水浴一下，使得这些东西解聚
有时候DTT之类也搞不定的
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6楼2008-08-07 12:47:36
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