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wangning-188

铜虫 (小有名气)

[交流] 关于不同品牌marker的问题

本人纯化了一种文献报道为12kd左右的蛋白,用bio-rad和 fermentas两家公司的标准蛋白做sds-page,结果发现形成的二聚体,两家标准蛋白分别做对照,对应的分子量为24和28k,怎么解释这个问题?
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

24kDa和28kDa本来就很难区分开来吧……基本上条带粗一点点就看不出来区别了
2楼2008-08-07 10:44:24
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wangning-188

铜虫 (小有名气)

[quote]Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2008-8-7 10:44:
24kDa和28kDa本来就很难区分开来吧……基本上条带粗一点点就看不出来区别了 [/quote
我没说清楚啊,我是说形成的二聚体,一个marker对应过去为24k,二另一个对应过去为28k,想知道原因?
3楼2008-08-07 10:48:00
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
wangning-188(金币+3,VIP+0):en
我的意思就是说
形成的二聚体,大小合理应该是24kDa,但是由于28kDa的marker实在和24kDa太接近了,所以就会觉得其实就在28kDa的位置上

另,该蛋白是否会形成异质二聚体呢?
4楼2008-08-07 11:05:32
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hqhe

木虫 (正式写手)

我有一点不明白,做SDS-PAGE的时候蛋白应该是会被变性的吧,何来二聚体呢?
5楼2008-08-07 12:40:46
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by hqhe at 2008/8/7, 12:40:
我有一点不明白,做SDS-PAGE的时候蛋白应该是会被变性的吧,何来二聚体呢?

有可能的,蛋白样品放太久就会出现一些古古怪怪的东西
所以有时候上样之前要沸水浴一下,使得这些东西解聚
有时候DTT之类也搞不定的
6楼2008-08-07 12:47:36
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